一、血清SOD LPO及心肌酶的测定对治疗小儿心功能衰竭的临床意义(摘要)（论文文献综述）
贾飞凡[1]（2021）在《双参宁心胶囊调控线粒体自噬抗小型猪心肌缺血再灌注损伤机制研究》文中研究说明目的研究双参宁心胶囊（SSNX）对小型猪心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemical reperfusion injury,MIRI）的保护作用,从 PINK1/Parkin 通路揭示其调控心肌细胞线粒体自噬保护MIRI的作用机制。第一部分双参宁心胶囊对小型猪MIRI的保护作用研究1.材料与方法1.1动物分组与给药雄性巴马小型猪随机分为假手术组、模型组、阳性药组,SSNX预防治疗组,SSNX治疗组,每组各6头。SSNX预防治疗组（20mg·kg-1）于MIRI术前7天给药,其余4组常规喂养7天。第7天,除假手术组外,其余各组予介入球囊阻断心脏冠脉左前降支近端血流制备心肌缺血再灌注损伤模型。SSNX治疗组及预防治疗组动物术后予SSNX（20mg·kg-1）拌饲喂养7天,阳性药组予尼可地尔（1.2mg·kg-1）拌饲喂养7天,假手术及模型组予普通饲料常规喂养7天。1.2 MIRI模型评估于术后15分钟行心电图检测,通过心电图变化评估模型构建是否成功。1.3舌象分析及生化指标测定分别于术前、术后7天采血,酶联免疫吸附法检测血清心肌肌钙蛋白（cTnT）含量,IFCC法检测血清乳酸脱氢酶（LDH）含量,比色法测定血清肌酸激酶同工酶（CK）,免疫抑制法测定肌酸激酶MB同工酶（CK-MB）。全自动血凝仪监测凝血指标凝血酶原时间（PT）活化部分凝血活酶时间（APTT）,血浆纤维蛋白原（FIB）,硝酸还原酶法测定一氧化氮（NO）,酶联免疫法测定内皮素1（ET-1）,酶联免疫吸附法检测脑钠尿肽（BNP）,微量法检测血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）。同一时间观察小型猪舌象并进行拍照,图像分析软件分析小型猪舌象色彩分级R、G、B值指标。1.4影像学评估心功能于术后30分钟及术后7天行心脏超声检查,术后7天行心脏核磁共振技术（MRI）观察小型猪心肌梗死情况。1.5心肌梗死面积计算及病理形态学观察术后7天处死所有动物并取其冠脉左前降支近端分布区域心肌;NB-T染色后用MPIAS-500型多媒体彩色病理图文分析系统软件测量心肌梗死面积。HE染色及Masson染色法观察心肌血管及心肌组织的病理变化。2.结果2.1舌象分析正常组小型猪舌质淡红,苔薄白;模型组小型猪舌质较正常组颜色偏暗,苔暗白,舌象R值降低,舌象G、B值均升高;SSNX组小型猪与模型组相比舌质暗红、苔暗白均有改善,舌象R值升高,舌象G、B值均显着降低。2.2各组小型猪生化指标比较模型组小型猪血清CK、CK-MB、LDH活性、cTnT含量较假手术组升高,SSNX组较模型组血清CK、CK-MB、LDH活性、cTnT含量降低。凝血功能相关指标显示,模型组较假手术组PT、APTT时间延长,FIB值减少;与模型组比较,SSNX各组PT、APTT时间缩短,FIB值升高。与假手术组比较,模型组SOD活力降低,MDA值升高;与模型组比较,各给药组SOD活力升高,MDA值降低。内皮功能指标显示,假手术组血清ET-1较模型组升高,NO值降低。各给药组与模型组比较,血清ET-1降低,NO值升高。模型组较假手术组BNP升高,SSNX各组较模型组BNP降低。2.3影像学评估心脏超声结果示,与正常组比较,模型组小型猪多项心脏功能指标发生变化,射血分数、短轴缩短分数降低,收缩末期内径、收缩末期体积、舒张末期内径、舒张末期体积升高;与模型组比较,双参宁心组小型猪射血分数EF、短轴缩短分数FS升高,舒张末期体积明显降低。MRI结果示,假手术组小型猪心脏结构完整,各瓣膜血流及开合无异常。模型组小型猪左心室及心内膜内侧出现大面积高密度影,甚有室间隔断裂现象,提示模型组小型猪心肌缺血程度严重,甚有心肌坏死出现,心肌损伤严重。SSNX给药组也可见部分高密度影,但高密度影面积较小,且心脏形态相对完整,损伤程度较模型组轻。2.4病理形态学观察HE及Masson染色示,正常组心肌纤维排列整齐,无变性坏死与肿胀断裂,无炎细胞浸润;模型组心肌纤维大片坏死、钙化,心肌纤维变性、断裂,纤维组织增生,炎细胞浸润,坏死区充血、出血;阳性药组肌纤维部分排列整齐,心肌细胞形态正常,心肌纤维中斑片状心肌纤维变性坏死及脂肪变性,伴部分组织增生、炎细胞浸润;SSNX各组心肌纤维大部排列整齐,心肌细胞核呈圆形,位于细胞中央,部分心肌纤维中斑片状心肌纤维变性坏死,伴少量增生、炎细胞浸润。2.5心梗面积比较与模型组比较,SSNX预防治疗组及SSNX治疗组心肌梗死面积与心肌总面积的比值明显降低,阳性药组心肌梗死面积与心肌总面积的比值较模型组亦降低。3.小结小型猪MIRI模型构建成功。SSNX可降低MIRI小型猪的血清心肌酶水平,改善血管内皮功能与凝血功能;还可通过升高SOD活性,降低MDA水平以抗氧化应激;可显着减少MIRI小型猪的心肌梗死面积。影像学与病理形态学表明,模型组心肌损伤最为严重,阳性药次之,SSNX治疗组随后,SSNX预防治疗组损伤最轻。上述研究结果证明,SSNX可改善MIRI小型猪的心功能,对MIRI所致的心肌损伤具有明确保护作用。第二部分双参宁心胶囊对小型猪MIRI线粒体自噬作用机制研究1.材料与方法1.1动物分组与给药方法与第一部分相同。1.2 ATP及Δψm检测评价能量代谢及线粒体功能取新鲜心肌组织通过磷钼酸比色法检测缺血心肌三磷酸腺苷（ATP）含量,荧光探针法检测心肌细胞中线粒体膜电位（Δψm）水平的变化。1.3心肌超微结构观察透射电镜下观察心肌细胞线粒体及线粒体自噬超微结构变化。1.4 qRT-PCR检测相关基因表达,Western Blot检测相关自噬蛋白表达水平实时荧光定量PCR法检测心肌组织中自噬相关基因的转录水平,Western Blot法测定心肌 LC3-B、cleaved caspase-3、PINK1、Parkin 蛋白表达情况。2.结果2.1各组小型猪能量代谢及线粒体功能比较与假手术组比较,模型组心肌ATP含量及线粒体膜电位显着降低;与模型组比较,SSNX各组心肌ATP含量及线粒体膜电位显着升高,阳性药组虽有升高趋势,但升高不如SSNX各组明显。2.2心肌超微结构透射电镜下可见假手术组小型猪心肌肌丝形态完整、排列紧密,线粒体膜结构和嵴结构基本正常,整体无明显肿胀,排列较好;模型组小型猪可见心肌肌丝明显断裂或疏松,线粒体肿胀变大或空泡化、内部结构疏松,心肌组织和线粒体内均有自噬体形成;SSNX治疗组,SSNX预防治疗组,阳性药组心肌肌丝虽有断裂或疏松,但较模型组程度显着减轻,线粒体肿胀变大但形态相对完好,嵴突疏松程度降低,整体无显着空泡化,心肌组织和线粒体内有少量自噬体结构。2.3相关蛋白基因表达水平比较qRT-PCR结果示,PINK1、Parkin、Cleaved caspase-3、LC3B的mRNA基因表达水平较模型组均显着升高;给药组各蛋白基因表达水平较模型组均呈显着下降趋势,且SSNX预防治疗组下降最明显,SSNX治疗组次之,其次是阳性药组。2.4相关自噬通路蛋白表达水平比较Western Blot结果示,模型组PINK1/Parkin通路、Cleaved caspase-3自噬凋亡通路、LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ比值表达水平较假手术组均呈升高趋势;给药组各蛋白表达水平较模型组均呈显着下降趋势,且SSNX预防治疗组下降值最明显,SSNX治疗组次之,阳性药组下降值相对较小,该结果与qRT-PCR趋势一致。3.小结小型猪MIRI心肌线粒体自噬增加,SSNX可减少线粒体膜电位及ATP含量,保护缺血再灌损伤后的心肌,其机制可能是通过抑制PINK1/Parkin自噬通路,抑制线粒体自噬的过度激活,减少心肌细胞凋亡和线粒体损伤而实现的。结论双参宁心胶囊对心肌缺血再灌注损伤小型猪心肌组织有保护作用,可减轻心肌组织结构损伤及维持线粒体功能相对完整,其机制可能是通过抑制PINK1/Parkin通路介导的线粒体自噬过度激活,从而保护心肌缺血再灌注损伤后小型猪心脏功能。
贾思[2]（2021）在《基于Nrf2/HO-1信号通路探讨参附注射液改善心肺复苏后大鼠心肌细胞氧化应激损伤的研究》文中进行了进一步梳理心脏骤停是心脏搏动的突然终止,引起全身器官缺血缺氧及功能障碍,是临床上常见的紧急事件。尽管CPR技术在不断改善,但心脏骤停的死亡率仍居高不下。复苏后心功能不全是自主循环恢复后早期死亡的主要原因,因此如何恢复心脏骤停的泵血功能,改善复苏后心肌损伤的程度,是降低心肺复苏后死亡率的关键因素。参附注射液是临床上用于抢救的常用中成药,具有益气温阳,回阳救逆的功效。近年来大量基础实验证实参附注射液对治疗缺血再灌注损伤具有明显的疗效,故本研究通过动物实验并对其组织进行生物学分析,证明参附注射液可改善窒息合并冰氯化钾诱导的心脏骤停大鼠复苏后的心肌损伤,主要研究内容和实验结果如下:目的:通过观察参附注射液对氧化应激相关通路Nrf2/HO-1轴的调节作用,从分子水平探讨参附注射液改善大鼠复苏后心肌损伤的机制。方法:40只雄性SD大鼠,随机抽取30只大鼠进行窒息合并冰氯化钾诱导心脏骤停处理,五分钟后给予心肺复苏等一系列治疗措施,待自主循环恢复后随机分为三组,每组10只:正常复苏组在复苏成功后1h和早九晚五注射生理盐水1ml/次;参附2ml/kg组:在复苏成功后1h注射参附注射液2ml/kg,早九晚五注射参附注射液2ml/kg;参附7ml/kg组:在复苏成功后1h注射参附注射液7ml/kg,早九晚五注射参附注射液7ml/kg。另外10只作为假手术组:只进行气管插管及动静脉置管处理,操作完成后1h及早九晚五注射生理盐水1ml/次。24h后取材,检测血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）、心肌肌钙蛋白I（cTnI）水平,分析心脏骤停心肺复苏后心肌损伤程度;TBA法检测氧自由基丙二醛（MDA）水平、WST-1法检测心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）活力,判断心脏骤停后心肌氧化应激水平;Western Blot检测Nrf2、p-Nrf2、HO-1蛋白表达水平,实时荧光定量分析（RT-PCR）检测HO-1 mRNA、NQO1 mRNA表达;免疫荧光观察心肌组织细胞核内p-Nrf2蛋白的荧光表达。结果:1.血清心肌酶比较结果显示,复苏成功后24h,正常复苏组CK-MB水平高于假手术（P<0.01）、正常复苏组cTnI水平高于假手术组（P<0.01）;参附注射液2ml/kg组CK-MB水平与正常复苏组相比降低（P=0.03）、参附注射液2ml/kg组cTnI水平与正常复苏组相比降低（P=0.001）;参附注射液7ml/kg组较参附注射液2ml/kg组CKMB水平有所降低（P=0.011）、参附注射液7ml/kg组较参附注射液2ml/kg组cTnI水平下降（P=0.039）。2.氧化应激指标检测结果显示,正常复苏组SOD活力低于假手术组（P<0.01）、参附注射液2ml/kg SOD活力高于正常复苏组（P=0.023）、参附注射液7ml/kg组SOD活力高于参附注射液2ml/kg（P=0.0445）;正常复苏组MDA水平高于假手术组（P<0.01）、参附注射液2ml/kg组MDA水平低于正常复苏组（P<0.01）、参附注射液7ml/kg组MDA水平低于参附注射液2ml/kg（P=0.031）。3.Western Blot结果显示,造模成功24h后,正常复苏组与假手术比较,大鼠心肌组织细胞质Nrf2表达量明显升高（P=0.041）、HO-1的表达量也明显升高（P<0.01）,表明造模成功24h时大鼠心肌组织中的Nrf2信号通路被激活,并启动了下游信号分子HO-1的转录,但p-Nrf2较假手术组无明显差异,但有上升趋势（P=0.07）,这可能与样本量不足有关。同时,与模型组比较,参附注射液2ml/kg组心肌组织中细胞质Nrf2蛋白表达明显升高（P=0.036）、p-Nrf2蛋白表达升高（P=0.003）、HO-1表达明显升高（P=0.001）,说明参附注射液可升高心脏骤停心肺复苏后大鼠心肌组织中Nrf2、HO-1和p-Nrf2蛋白的表达;参附注射液7ml/kg组较参附注射液2ml/kg组细胞质Nrf2蛋白表达升高（P=0.046）、p-Nrf2蛋白表达明显升高（P=0.002）、HO-1蛋白表达也明显升高（P=0.009）,表明高剂量组较正常剂量组效果更优。说明心脏骤停/心肺复苏后心肌组织因缺血缺氧性损伤而激活了氧化应激反应,而参附注射液可能会通过调节Nrf2/HO-1信号通路影响氧化应激水平发挥保护心肌组织的作用,且高剂量组优于正常剂量组。4.实时荧光定量PCR结果显示,与假手术组相比,心脏骤停大鼠心肌组织HO-1mRNA相对表达水平升高（P=0.048）、NQO1mRNA的相对表达水平升高（P=0.044）;与模型组比较,参附注射液2ml/kg组心肌组织中HO-1mRNA相对表达水平明显上调（P=0.001）、NQO1mRNA的相对表达水平升高（P=0.047）;参附注射液7ml/kg组较参附注射液2ml/kg组HO-1 mRNA表达水平升高（P=0.006）、NQO1mRNA的相对表达水平升高（P=0.041）。5.免疫荧光分析结果得出,假手术组细胞的p-Nrf2蛋白主要在细胞质中表达;在心脏骤停/心肺复苏后p-Nrf2部分转移至细胞核中;参附注射液进行干预后细胞核中p-Nrf2蛋白的表达明显增加,且呈高剂量组优于正常剂量组。结论:参附注射液可有效减轻窒息合并冰氯化钾导致的心脏骤停大鼠模型的心肌损伤程度,其保护作用可能与抗氧化应激相关蛋白Nrf2、HO-1、NQO1的表达有关。
李全生[3]（2019）在《基于Nrf2/HO-1通路探讨益脉颗粒对高脂合并MIRI大鼠心肌损伤的影响及机制》文中研究指明目的:通过构建高脂合并心肌缺血再灌注损伤（MIRI）大鼠模型,探讨益脉颗粒对高脂合并MIRI的保护作用。以Nrf2/HO-1通路介导的炎症、氧化应激、细胞凋亡为切入点,旨在揭示益脉颗粒对高脂合并MIRI的保护作用以及分子机制。材料与方法:1.益脉颗粒对高脂合并MIRI大鼠心肌损伤的保护作用（1）将100只大鼠随机分5组,分别为假手术组、模型组、益脉颗粒高、中、低剂量组,每组20只。假手术组动物常规饲养,其余各组给予高脂饲料喂养2周,其他条件相同。假手术组、模型组大鼠每日灌服生理盐水10ml/kg,益脉颗粒低、中、高剂量组每日灌服中药煎液10ml/kg,灌胃次数为日2次,MIRI造模前连续给药1周。各组大鼠心肌缺血30分钟再灌注2小时后,原位结扎冠状动脉左前降支,快速取出心脏,生理盐水冲洗,冻存于-20℃,后进行心肌梗死面积测定。同时大鼠腹主动脉进行取血,后分离血清备用。心肌梗死面积测定取材剩余的心脏组织冻存于-80℃超低温冰箱中备用。（2）全自动生化分析仪检测各组大鼠血清血脂水平（TG、TC、HDL-C及LDL-C）。（3）紫外分光光度计检测各组大鼠血清心肌酶谱水平（CK、CK-MB、HBDH及LDH）。（4）TTC法检测各组大鼠心肌梗死面积。（5）HE染色检测各组大鼠心脏组织形态学变化。（6）分析各组大鼠心电图ST段及T波变化。2.益脉颗粒对高脂合并MIRI大鼠心肌相关炎症因子的影响（1）造模及分组同上。（2）ELISA法检测各组大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1β的水平。（3）RT-qPCR法检测大鼠心肌组织中TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达。（4）Western blot法测定各组大鼠心肌组织中NF-κB蛋白表达。3.益脉颗粒通过Nrf2/HO-1通路影响高脂合并MIRI大鼠的氧化应激和细胞凋亡（1）造模及分组同上。（2）荧光探针法测定各组大鼠心肌组织中ROS的活性。（3）ELISA法测定各组大鼠血清中MDA、SOD、GSH-px的活性。（4）RT-qPCR法检测大鼠心肌组织中Nrf2、HO-1 mRNA的表达。（5）Western blot法测定各组大鼠心肌Bax、Bcl-2、Caspase3、Nrf2及HO-1蛋白的表达。结果:1.血清血脂水平检测表明,与模型组比较,益脉颗粒高剂量组可显着降低大鼠血清TG,TC,LDL-C水平,显着升高HDL-C水平（与模型组比较,P<0.01）。2.血清心肌酶谱水平检测表明,益脉颗粒高剂量组可显着降低大鼠血清CK、CK-MB、HBDH、LDH水平（与模型组比较,P<0.01）。3.HE染色显示,益脉颗粒高剂量组只有少量坏死区域,心肌纤维排列较整齐,心肌细胞间质仅有少量炎性细胞浸润,结构清晰,能够显着改善心肌组织MIRI损伤的病理学改变。4.心肌梗死面积检测发现,益脉颗粒高剂量组能够明显减少大鼠心肌梗死面积（与模型组比较,P<0.01）。5.心电图结果分析表明,益脉颗粒高剂量可显着回降MIRI大鼠升高的ST段及T波水平（与模型组比较,P<0.01）。6.ELISA检测结果显示,益脉颗粒高剂量组能够显着降低MIRI大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1β的水平（与模型组比较,P<0.01）。7.RT-qPCR法检测结果示,益脉颗粒高剂量组能够显着降低大鼠心肌组织中TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA的表达（与模型组比较,P<0.01）。8.Western blot检测结果示,益脉颗粒高剂量组能够显着降低大鼠心肌组织中NF-κB蛋白表达水平（与模型组比较,P<0.01）。9.荧光探针法检测ROS结果示,益脉颗粒高剂量组能够显着下调ROS水平（与模型组比较,P<0.01）。10.ELISA检测结果示,益脉颗粒高剂量组能够显着升高大鼠血清SOD、GSH-px水平,显着降低MDA水平（与模型组比较,P<0.01）。11.Western blot检测结果示,益脉颗粒高剂量组可显着升高大鼠心肌组织Bcl-2水平,显着降低Bax、Caspase3水平（与模型组比较,P<0.01）。12.Western blot检测结果示,益脉颗粒高剂量组可显着提高大鼠心肌组织Nrf2、HO-1蛋白的表达水平（与模型组比较,P<0.01）。13.RT-qPCR法检测结果示,益脉颗粒高剂量组能够显着提高大鼠心肌组织Nrf2、HO-1mRNA的表达水平（与模型组比较,P<0.01）。结论:1.益脉颗粒可以起到改善高脂合并心肌缺血再灌注损伤模型大鼠的血脂紊乱及减轻心肌缺血再灌注损伤的作用。2.益脉颗粒可以通过减轻炎症反应、抗氧化应激及抑制细胞凋亡来改善心肌缺血再灌注损伤,起到保护心肌的作用。3.益脉颗粒可以通过调控Nrf2/HO-1通路进而抑制氧化应激和细胞凋亡改善心肌缺血再灌注损伤。
张珊[4]（2019）在《刺五加注射液对心脏毒性和脑缺血损伤的保护作用和机制研究》文中提出目的:采用化疗药物阿霉素诱导大鼠心脏毒性模型,研究刺五加注射液对心脏收缩功能下降的改善作用,为其临床应用提供实验依据;采用三氯化铁（FeCl3）致大鼠大脑中动脉阻断模型（Middle cerebral artery occlusion,MCAO）,研究刺五加注射液抗脑缺血药理作用、抗脑缺血相关作用机制,为其治疗脑缺血损伤的临床应用,提供必要的药理学实验依据。方法:1)采用阿霉素诱导大鼠心脏毒性模型,造模方法为将50只大鼠随机分成5组,每组10只,ip 2.5 mg/kg的盐酸阿霉素,每周注射1次,共6周,累积总药量15 mg/kg。刺五加注射液高、中、低剂量（200、100、50 mg/kg）组及阳性药参芪扶正注射液（25 mL/kg）组,分别于阿霉素注射后立即尾静脉输注相应的药液,时长1 h,共6次。给药结束后测定大鼠心脏收缩功能参数,包括射血分数（EF）、缩短分数（FS）、左室压最大上升速率(+LVdp/dtmax)以及心脏构型;免疫组化法测定心肌细胞凋亡率;化学法测定血清超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）、脂质过氧化物（LPO）氧化应激因子水平,酶联免疫法测定凋亡相关蛋白表达水平;电镜下观察心肌组织的超微结构变化。2)采用FeCl3血栓形成法致大鼠大脑中动脉阻断模型,待大鼠清醒后进行神经功能缺陷评分。选取造模成功大鼠30只,采用随机数字表法将其分成5组,每组6只,刺五加注射液高、中、低剂量（45、22.5、11.25mg/kg）组及阳性药灯盏花素（4.5mg/kg）组尾静脉输注相应的药液,时长1 h,共3次。给药前后采用盲法对动物进行神经功能缺陷评分,给药结束后测定脑梗死范围、脑水肿、血小板聚集功能和凝血参数（PT、TT、APTT、FIB）、氧化应激因子（SOD、MDA、GSH、GSH-Px）、炎性因子（ICAM-1、VCAM-1、IL-1β、IL-6、TNF-α）,酶联免疫法测定TXB2、6-k-PGF1α,化学法测定NO含量。结果:1)与模型组相比,刺五加注射液200、100、50 mg/kg治疗后,可改善心脏收缩功能:使下降的EF、FS、+LVdp/dtmax均显着增加（P<0.05、0.01）;刺五加注射液可改善心脏构型:使扩张的收缩期的左室内径（LVIDs）明显缩短（P<0.05、0.01）;使扩张的收缩期的左室腔体积（LVVs）显着缩小（P<0.05、0.01）。刺五加注射液可显着抑制阿霉素引起的心肌细胞凋亡（P<0.01）,使Bax/Bcl-2显着降低（P<0.01）。刺五加注射液200、100 mg/kg可不同程度降低LPO、MDA生成量,提高SOD活性。2)与模型组相比,刺五加注射液45、22.5、11.25mg/kg治疗后,各项检测指标分别有不同程度改善:45mg/kg高剂量下,神经功能缺陷得到明显改善（P<0.001）;45mg/kg高剂量下,脑梗死范围明显缩小（P<0.01）,水肿程度明显降低（P<0.05）;45mg/kg高剂量下,血小板聚集功能得到抑制（P<0.001）;45mg/kg高剂量下,氧化应激因子MDA生成量降低（P<0.05）,GSH-PX活性提高（P<0.05）,MDA/SOD比值显着降低（P<0.01）;45mg/kg高剂量下,TXB2/6-k-PGF1α（T/P）比值显着降低;除刺五加注射液11.25mg/kg,炎性因子IL-1β均显着降低（P<0.050.01）,45mg/kg高剂量下IL-6、TNFα不同程度降低。结论:刺五加注射液能有效改善由阿霉素诱导的大鼠心脏收缩功能下降,可增强心脏收缩功能、改善心脏构型,减轻心肌组织超微结构损伤,其机制可能与减轻氧化应激损伤、抑制受损心肌细胞凋亡有关;对FeCl3导致的大脑中动脉缺血引起的局灶性脑梗塞损伤有治疗效果,可改善神经功能缺陷,减小脑梗死范围、水肿程度,抑制血小板聚集,其机制可能与氧化/抗氧化应激因子平衡、炎症损伤、血栓素/前列环素平衡、血小板功能调节有关。
韩雪[5]（2019）在《基于TLR4/MAPKs/NF-κB信号通路和钙通道的6-姜酚心肌保护作用及机制研究》文中进行了进一步梳理氧化应激、免疫炎症反应、细胞凋亡和钙离子超载等是导致心肌损伤的重要生物学事件。心肌缺血损伤时,Toll样受体4/核因子кB（TLR4/NF-кB）信号通路激活,氧自由基和细胞炎性因子大量释放,丝裂原活化蛋白激酶族（MAPKs）信号被激活,使转录因子和细胞蛋白磷酸化,加剧炎症反应,诱发细胞凋亡,引起细胞坏死。因此,TLR4/MAPKs/NF-кB信号通路与心肌损伤密切相关。钙超载参与心肌损伤的发病机制,可能与引起心律失常、细胞过度挛缩、线粒体Ca2+积累有关。外源性Ca2+主要通过L-型钙通道进入细胞,L-型钙通道阻滞剂能够通过抑制钙通道来保护心肌缺血损伤。因此,可以削弱L-型Ca2+电流(ICa-L)的药物有望用于心肌保护。生姜中有效成分6-姜酚（6-Gingerol,6-Gin）具有抗炎、降血压、抗动脉粥样硬化等药理活性,在心血管疾病中发挥重要作用,但是6-Gin心肌保护作用分子机制尚未可知。本研究通过动物实验和细胞实验,基于TLR4/MAPKs/NF-кB信号通路和钙通道对6-Gin心肌保护作用机制进行初步探讨。第一部分6-Gin对心肌纤维化小鼠的保护作用及机制研究目的:基于TLR4/MAPKs/NF-кB信号通路探讨6-Gin对心肌纤维化（MF）小鼠的保护作用及机制。方法:50只小鼠随机分为空白对照组（Con）、异丙肾上腺素模型组（ISO）、6-Gin低剂量组（L-6-Gin）、6-Gin高剂量组（H-6-Gin）、普萘洛尔组（Pro）5组,每组10只。Con组小鼠灌胃、同时皮下注射生理盐水,ISO组小鼠灌胃生理盐水,同时皮下注射ISO（10 mg/kg/d）。L-6-Gin组和H-6-Gin组灌服6-Gin（10,20 mg/kg/d）,同时皮下注射ISO（10 mg/kg/d）,Pro组腹腔注射Pro（40 mg/kg/d）,同时皮下注射ISO（10 mg/kg/d）,连续14天。比色法、免疫组化方法、TUNEL染色和Western blot等方法观察6-Gin对ISO致心肌纤维化小鼠氧化应激、炎性反应、细胞凋亡及TLR4/MAPKs/NF-кB信号通路的影响。结果:1.6-Gin能显着降低ISO诱导的MF小鼠心率和J点的抬高。2.6-Gin能显着降低ISO诱导的MF小鼠心脏重量指数（CWI）和左心室重量指数（LVWI）。3.6-Gin能显着降低ISO诱导的MF小鼠血清肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）水平。4.HE染色和天狼星红染色结果显示6-Gin能改善MF小鼠心肌纤维化程度。5.6-Gin能显着升高MF小鼠心肌组织超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽（GSH）活性,降低丙二醛（MDA）含量和钙离子含量。6.免疫组化结果显示,6-Gin能降低MF小鼠肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、c-fos和c-jun的表达。7.TUNEL结果显示,6-Gin能降低MF小鼠凋亡细胞数量;Western blot结果显示6-Gin能降低MF小鼠心肌组织Bax和Caspase-3表达,升高Bcl-2表达,抑制细胞凋亡。8.Western blot结果显示,6-Gin能降低MF小鼠TLR4、p38分裂原活化蛋白激酶（p38）、p-p38、细胞外调节蛋白激酶（ERK1/2）、p-ERK1/2、c-Jun氨基端激酶（JNK）、p-JNK、NF-kB蛋白表达。第二部分6-Gin对H9c2心肌细胞缺氧损伤的保护作用及机制研究目的:基于p38/NF-кB信号通路探讨6-Gin对氯化钴（CoCl2）致H9c2心肌细胞缺氧损伤的保护作用及机制。方法:H9c2心肌细胞分为4组:1)Con组;2)CoCl2组:400μmol/L（μM）的CoCl2处理;3)L-6-Gin组:20μM的6-Gin孵育12小时+400μM的CoCl2孵育22小时;4)H-6-Gin组:40μM的6-Gin孵育12小时+400μM的CoCl2孵育22小时。利用比色法、Elisa法、流式细胞技术和Western blot等方法观察6-Gin对CoCl2致H9c2心肌细胞缺氧损伤的保护作用及对p38/NF-кB信号通路的影响。结果:1.CoCl2对H9c2心肌细胞存活率影响的实验表明,200,300,400,500和600μM的CoCl2分别处理H9c2心肌细胞22小时,存活率明显降低,400μM的CoCl2处理细胞存活率下降50%左右,因此选择400μM的CoCl2作为低氧损伤浓度。2.6-Gin对H9c2心肌细胞存活率影响的实验表明,10,20,30,40,50和60μM的6-Gin分别处理H9c2心肌细胞12小时,对细胞存活率没有影响,参考相关文献选择20和40μM的6-Gin作为干预浓度。3.6-Gin能显着降低细胞上清液中CK和LDH释放量。4.6-Gin能显着降低细胞活性氧（ROS）的生成,降低细胞内钙含量和MDA含量,升高SOD、CAT和GSH水平。5.Elisa检测结果显示,6-Gin能显着降低细胞TNF-α和IL-6的含量。6.流式细胞仪检测结果显示,6-Gin能显着降低细胞凋亡率。7.Western blot结果显示,6-Gin能显着降低p38和NF-kB的蛋白表达,升高Nrf2、HIF-1a和HO-1蛋白表达。第三部分6-Gin对大鼠心肌细胞L-型钙通道、收缩力及钙瞬变的影响目的:通过观察6-Gin对大鼠心肌细胞ICa-L、收缩力和钙瞬变的影响,探讨其心肌保护作用分子机制。方法:利用全细胞膜片钳技术、心肌细胞收缩及离子浓度同步测量系统观察6-Gin对大鼠心肌细胞ICa-L、收缩力和钙瞬变的影响。结果:1.300μM的6-Gin可以显着地抑制正常心肌细胞和缺血心肌细胞的ICa-L,抑制率分别为58.17±1.04%和55.22±1.34%,且在给予细胞外液后,钙电流可部分恢复到给药前水平。2.6-Gin以浓度依赖性方式抑制ICa-L,3,10,30,100和300μM的6-Gin的抑制率分别为8.71±0.60%,16.2±0.80%,32.67±0.76%,54.33±1.89%和58.17±1.04%。3.3,30和300μM的6-Gin可在激活电位和峰电位保持不变的情况下显着上移I-V关系曲线。4.6-Gin对ICa-L的稳态激活和失活无显着性作用。5.300μM的6-Gin能够显着抑制心肌细胞收缩幅度,抑制率为48.87±5.44%,钙瞬变的峰值下降42.5±9.79%。6.300μM的6-Gin能显着抑制心肌细胞收缩达峰时间的50%（Tp50）及恢复基线水平时间的50%（Tr50）,降低细胞收缩和舒张的最大速率（±dL/dt）。结论:1.6-Gin对ISO致心肌纤维化小鼠的保护作用机制与抑制TLR4/MAPKs/NF-kB信号通路,抑制氧化应激、炎症反应和细胞凋亡有关。2.6-Gin对CoCl2致H9c2心肌细胞缺氧损伤的保护作用机制与抑制p38/NF-kB通路,激活Nrf2通路,升高HIF-1a和HO-1表达,进而抑制氧化应激、炎性因子释放和细胞凋亡有关。3.6-Gin能显着抑制心肌细胞ICa-L,减少钙离子内流,从而抑制心肌细胞[Ca2+]i和收缩力,这可能是其心肌保护的分子机制之一。
祁烁[6]（2018）在《芪冬颐心口服液防治化疗心脏毒性及其改善心气虚证的研究》文中进行了进一步梳理1研究目的通过基础实验结合临床试验,深入探讨芪冬颐心口服液对恶性肿瘤患者化疗后心脏毒性的保护作用,明确其的保护作用机制及物质基础,以及对化疗后心气虚证的改善作用,借以发展和创新化疗药物心脏毒性的中医药防治理论与内涵,指导中医药干预化疗药物心脏毒性临床应用。2研究方法2.1基础研究实验一:选取90只雄性BALB/c小鼠随机分为6组:空白对照组、阿霉素模型组、右丙亚胺阳性药组、芪冬颐心口服液10ml/kg剂量组（临床等效剂量）、芪冬颐心口服液25ml/kg剂量组、芪冬颐心口服液50ml/kg剂量组,每组15只。BALB/c小鼠空白对照组及阿霉素模型组给予蒸馏水灌胃,芪冬颐心口服液各剂量组给予不同剂量的芪冬颐心口服液灌胃。给药7天后,右丙亚胺阳性药组腹腔注射右丙亚胺200mg/kg。一小时后除空白对照组外,其余5组均腹腔注射阿霉素15mg/kg,再饲养14天。观察指标:①心功能相关指标:第14天监测实验各组小鼠超声心动图、心电图、心肌酶水平并记录。通过监测实验各组小鼠超声心动、心电图变化情况及心肌酶活性,评价芪冬颐心口服液对ADM心脏毒性心功能的保护作用。②心肌细胞损伤及凋亡相关指标:造模第14天取小鼠心脏进行心肌组织HE染色、TUNEL凋亡检测、心肌组织凋亡蛋白caspase3/9、Bcl-2、Bax的westernblot分析并记录,探讨芪冬颐心口服液对ADM心肌细胞损伤及凋亡的保护作用。实验二:选取90只S180荷瘤小鼠随机分为6组:肿瘤对照组、阿霉素组（阿霉素1mg/kg）、芪冬颐心口服液10ml/kg与阿霉素联合用药组、芪冬颐心口服液25ml/kg与阿霉素联合用药组、芪冬颐心口服液50ml/kg与阿霉素联合用药组、阳性对照组（右丙亚胺200mg/kg）,每组15只。正常对照组、阿霉素治疗组灌胃给予纯净水;芪冬颐心口服液各组灌胃给予不同剂量的芪冬颐心口服液;阳性对照组腹腔注射右丙亚胺200mg/kg。连续给药7天停药,再注射阿霉素12天。观察指标:①抑瘤率相关指标:第7天、第9天、第12天动态检测实验各组小鼠肿瘤长轴、短轴长度以及瘤重。通过动态检测小鼠肿瘤体积及重量变化,探讨芪冬颐心口服液对阿霉素抑瘤作用的影响。②心功能相关指标:造模前、造模第12天监测实验各组小鼠超声心动图、心电图、心肌酶水平并记录。通过监测实验各组小鼠超声心动、心电图变化情况及心肌酶活性,评价芪冬颐心口服液对ADM心脏毒性心功能的保护作用。③心肌细胞损伤及凋亡相关指标:第12天取小鼠心脏进行心肌组织HE染色、TUNEL凋亡检测、心肌组织凋亡蛋白caspase3/9、Bcl-2、Bax的westernblot分析并记录,探讨芪冬颐心口服液对ADM心肌细胞损伤及凋亡的保护作用。2.2临床研究采用中央随机对照、多中心临床试验方法,将符合纳入标准的恶性肿瘤化疗后心气虚证的患者通过中央随机分为芪冬颐心口服液组、生脉饮组。芪冬颐心口服液组（试验组）服用吉林通化白山药业股份有限公司生产的中成药芪冬颐心口服液（人参、麦冬、黄芪、茯苓、金银花、淫羊藿、紫石英、龟甲、生地、郁金、桂枝、丹参、炒枳壳）,每次2支,每日3次。生脉饮组（对照组）服用同仁堂股份有限公司生产的中成药制剂生脉饮（党参、麦冬、五味子）,每次1支,每日3次。干预14天统计相关治疗结果。对比不同访视点的心气虚证相关症候积分,观察芪冬颐心口服液对恶性肿瘤化疗后心气虚证相关指标的影响,探讨芪冬颐心口服液对恶性肿瘤化疗后心气虚证的改善作用。3研究结果3.1基础研究3.1.1心功能指标研究结果实验一:①超声心动图:与阿霉素模型组比较,芪冬颐心口服液组与给药剂量依赖性地提高左室横轴缩短率、心脏射血分数、舒张期左室容积;芪冬颐心口服液50ml/kg组与模型组比较,差异有统计学意义（p<0.01）;右丙亚胺组心功能水平升高,与模型组比较,差异有统计学意义（p<0.01）。②心电图:与阿霉素模型组比较,芪冬颐心口服液组呈剂量依赖性的降低心电图S-T段,增加心率,与模型组比较,差异有统计学意义（p<0.01）;芪冬颐心口服液50ml/kg组与右丙亚胺组比较,差异有统计学意义（p<0.05）。③心肌酶:与阿霉素模型组比较,芪冬颐心口服液剂量依赖性地降低小鼠血清LDH、CK、AST检测值,差异有统计学意义（p<0.01）;右丙亚胺组降低心肌酶活性优于芪冬颐心口服液各剂量组,差异有统计学意义（p<0.01）。实验二:①超声心动图:与阿霉素模型组比较,芪冬颐心口服液组与给药剂量依赖性地提高左室横轴缩短率,心脏射血分数,舒张期左室容积及左室实际重量LV Mass（AW）;芪冬颐心口服液50ml/kg组与模型组比较,差异有统计学意义（p<0.01）;右丙亚胺组心功能水平升高,与模型组比较差异有统计学意义（p<0.05）。②心电图:与阿霉素模型组比较,芪冬颐心口服液组呈剂量依赖性的降低心电图S-T段,差异有统计学意义（p<0.01）;右丙亚胺组显着降低心电图S-T段,与模型组比较,差异有统计学意义（p<0.01）;实验各组对小鼠心率无影响。③心肌酶:芪冬颐心口服液剂量依赖性地降低小鼠血清LDH、CK、AST检测值,两组比较,有统计学意义（p<0.01）;芪冬颐心口服液50ml/kg组降低LDH、CK作用优于右丙亚胺组组（p<0.01）。3.1.2心肌细胞损伤及凋亡指标研究结果:①TUNEL检测:阿霉素可以诱导正常小鼠/荷瘤小鼠心肌细胞凋亡,芪冬颐心口服液剂量依赖性的减少心肌细胞凋亡数量。②Westernblot检测:阿霉素组凋亡蛋白caspase3/9的表达显着增加,促凋亡蛋白Bax表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低;芪冬颐心口服液可以剂量依赖性的降低凋亡蛋白caspase3/9的表达,增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。3.1.3抑瘤作用研究结果.:第12天,阿霉素组小鼠肿瘤长轴、短轴长度明显下降,瘤重明显下降,与对照组比较,差异有统计学意义（p<0.01）;芪冬颐心口服液25ml/kg与阿霉素合用组、芪冬颐心口服液50ml/kg与阿霉素合用组,小鼠肿瘤长轴、短轴、瘤重明显下降,与对照组、阿霉素组比较,有统计学意义（P<0.01）。3.2临床研究3.2.1试验组组内单症候积分指标对比结果:试验组在用药后心悸、乏力、气短、汗出、失眠均有改善。乏力症状积分:访视点一及后续访视点与基线对比,差异有统计学意义（P<0.01）;汗出、失眠单症状积分统计,访视点二及访视点三与基线对比,差异有统计学意义（P0.01）;心悸、气短单症状积分统计,访视点三与基线对比,差异有统计学意义（P<0.01）。3.2.2组间单症候积分指标对比结果:①单症候积分改善情况研究结果:气短、乏力、汗出单症状积分改善情况,试验组显着优于对照组,差异有统计学意义（P<0.01）;失眠单症状积分改善方面,试验组优于对照组间,差异有统计学意义（P<0.05）;心悸积分改善方面,两组间无统计学差异（P>0.05）。②单症候有效性研究结果.:乏力、汗出方面,试验组有效性显着优于对照组,差异有统计学意义（P<0.01）;气短、失眠方面,试验组优于对照组间,差异有统计学意义（P<0.05）;心悸方面,两组间无统计学差异（P>0.05）。3.3.3组间总积分指标对比结果:两组间在基线及各访视点总积分无统计学差异（P>0.05）;两组总积分改善情况无统计学差异（P>0.05）。3.3.4两组症候积分线性变化趋势分析结果:①两组各单项症状积分、总积分,以访视时间为变化因素,均呈显着性下降趋势（P<0.01）;②气短、乏力积分变化曲线,两组间对比,具有统计学差异（P<0.05）;③心悸、汗出、失眠积分变化曲线,量组间对比,无统计学差异（P>0.05）;④两组总积分变化曲线,组间对比,具有统计学差异（P<0.01）。3.3.5安全性指标:试验组安全性指标试验前后对比,无统计学差异（P>0.05）。4研究结论4.1基础研究:芪冬颐心口服液对阿霉素具有增效减毒作用。芪冬颐心口服液可以剂量依赖性的改善阿霉素心脏毒性相关心功能减低（包括左室短轴缩短率（FS%）,心脏射血分数（EF%）,舒张期左室容积（LVVd）、左室实际重量（LV Mass）、收缩末期左室容积（LVVs））、心电图异常（包括心率减慢、ST-T段改变）、心肌酶升高（LDH、CK、AST）、心肌细胞损伤及凋亡（包括Caspase3、Caspase9、Bcl-2、Bax表达异常）;芪冬颐心口服液50ml/kg组与右丙亚胺在阿霉素的心脏保护作用方面基本一致;芪冬颐心口服液与阿霉素联合应用,具有协同抑瘤作用,优于阿霉素单独应用。4.2临床研究:芪冬颐心口服液可以有效改善化疗药物心脏毒性相关心气虚证,对乏力症状改善效果最有效、快速,在5天内即具可见显着的改善效果;对气短、汗出、失眠、心悸的症状改善均具有显着效果。芪冬颐心口服液对于化疗后血小板计数方面具有一定的潜在改善作用。
劳慧敏[7]（2017）在《基于JAK/STAT信号通路探讨养心活血解毒方对病毒性心肌炎心肌损伤的保护作用》文中研究指明目的:评价养心活血解毒方对心肌JAK/STAT信号通路的干预疗效,探讨养心活血解毒方发挥作用的可能存在的机制,找寻治疗病毒性心肌炎的新靶点。方法:健康SPF级BALB/c小鼠常规饲料喂养1周后,腹腔注射柯萨奇B3病毒建立病毒性心肌炎模型。选取造模成功小鼠随机分成模型对照组、利巴韦林组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组,另设空白组。空白组和模型对照组给予生理盐水,中药低中高剂量组给予中药养心活血解毒方,利巴韦林组给予利巴韦林颗粒。灌胃14天后观察小鼠一般情况、生存情况、体重变化,HE染色观察心肌病理改变,检测小鼠血清心肌酶谱水平,ELISA法检测小鼠血清IL-6、IL-10含量,免疫组化法观察心肌FAS、FASL在心肌中的表达,Western Blot观察JAK2、STAT3蛋白在心肌中的蛋白含量。结果:1.小鼠一般情况:养心活血解毒方高、中剂量可明显改善小鼠生活质量,各中药组死亡率较低,中药各组小鼠体重减少不明显,优于其他各组（P<0.05）。2.小鼠心肌酶的变化:与模型对照组相比,各治疗组CK-MB均降低（P<0.05）,其中以中药中剂量组CK-MB降低明显（P<0.05）,中药低、高剂量组与利巴韦林组CK-MB水平相当（P>0.05）;与模型对照组相比,各治疗组LDH均降低（P<0.05）,其中中药中、高剂量组降低最为明显（P<0.05）,中药中、高剂量组之间比较无差异。3.心肌组织光镜下观察病理改变:模型对照组心肌受损较重,心肌细胞出现灶性病变,部份心肌纤维断裂溶解,少量炎性细胞浸润,出现片状变性、坏死,炎症细胞灶状分布在坏死心肌的周围。利巴韦林组心肌病变程度较模型组轻,中药中高剂量组心肌病变较轻。4.ELISA检测血清IL-6、IL-10水平:与空白组比较,模型对照组血清IL-6的水平明显升高（P<0.05）,与模型对照组比较,各治疗组均可降低IL-6水平,中药中剂量组降低显着（P<0.05）。与空白组比较,模型对照组血清IL-10的水平明显降低（P<0.05）,与模型对照组比较,中药各组均可升高IL-10水平,中药高、中剂量组升高显着,优于中药低剂量组（P<0.05）。5.免疫组化法检测心肌FAS、FASL阳性表达:与模型对照组相比较,中药中、高剂量组FAS阳性表达降低最为明显（P<0.05）。与模型对照组相比较,中药中、高剂量组FASL阳性表达降低最为明显（P<0.05）,与利巴韦林组表达相当（P>0.05）。6.Western Blot检测心肌JAK2、STAT3蛋白:与空白组相比,模型对照组小鼠JAK2含量显着升高（P<0.05）,与模型对照组比较,各治疗组JAK2蛋白含量显着下降（P<0.05）,中药高、中剂量组、利巴韦林组下降最为显着（P<0.05）;与空白组相比,模型对照组小鼠STAT3蛋白含量显着升高（P<0.05）,与模型组比较,各治疗组STAT3蛋白含量显着下降（P<0.05）,中药高剂量组下降最为显着（P<0.05）。结论:1.养心活血解毒方可以提高病毒性心肌炎小鼠的生存质量,降低死亡率,促进模型小鼠体重的增长,减轻心肌损伤。2.养心活血解毒方可以减轻病毒性心肌炎小鼠心肌病理改变,降低血清心肌酶谱水平,降低病毒性心肌炎小鼠血清中IL-6的水平,升高血清中IL-10的水平,可抑制炎症,对心肌起到保护作用。3.养心活血解毒方可以降低病毒性心肌炎小鼠心肌组织中FAS、FASL的表达,减少心肌细胞的凋亡;降低心肌组织中JAK2、STAT3蛋白的表达,减少心肌细胞的损伤。
李彩虹[8]（2016）在《磷酸肌酸钠、维生素C联合抗病毒治疗对病毒性心肌炎患儿心肌损伤的保护作用》文中认为目的:分析磷酸肌酸钠、维生素C联合抗病毒治疗对病毒性心肌炎患儿心肌损伤的保护作用。方法:141例病毒性心肌炎患儿根据治疗方式不同分为常规治疗组（常规抗病毒治疗）、联合治疗组（磷酸肌酸钠、维生素C联合抗病毒治疗）,对比两组1个疗程后心肌损伤标志物、超声心动图参数、炎症因子、氧化/抗氧化指标差异。结果:联合治疗组治疗后血清心肌损伤标志物IMA、CK-MB、LDH、HBDH、cTNⅠ、MYO含量,超声心动图参数LAD、LVDD、RVDD、IVSD、RVOT值低于常规治疗组;血清炎症因子IL-10、IL-17、IL-23、IFN-γ含量低于常规治疗组;血清氧化指标NO、·OH、LPO、MDA含量低于常规治疗组,抗氧化指标SOD、SeGSH-Px含量高于常规治疗组。结论:磷酸肌酸钠、维生素C联合抗病毒治疗可积极保护病毒性心肌炎患儿的心功能,具体与其抗炎、抗氧化应激等作用相关。
罗敏[9]（2014）在《芪参益气滴丸后适应对急性冠脉综合征患者心肌保护作用的临床研究》文中指出冠心病是近年来人类生命健康的严重威胁。目前,我国的冠心病发病率和病死率逐年上升,每年有超过70万人死于冠心病,给国家财政和人民生活带来了极大的负担。急性冠脉综合征（ACS）是临床冠心病的一种急性危重的综合征,需要紧急、强化的医学干预。临床治疗急性冠脉综合征的有效措施主要有经皮冠状动脉介入治疗（PCI）、冠状动脉旁路移植术（CABG）和溶栓等再灌注疗法,但是却往往由于血管的重新灌注而致使心肌超微结构改变及心肌舒缩功能障碍,引起心功能及代谢异常等,严重影响患者的心脏梗死面积大小、心功能恢复及预后,这就是近年来提出的心肌缺血再灌注损伤。为了减轻心肌缺血再灌注损伤,科研工作者们的认识经历了从缺血预适应、药物预适应到缺血后适应、药物后适应的发展过程。但是由于临床上心肌梗死发生的时间不可预测,缺血预适应、药物预适应的临床应用受到了极大限制;而缺血后适应是一种机械性处理方法,不可避免血管壁损伤、斑块脱落等风险,使得临床应用也受到一定限制;因药物后适应具有安全性、可实施性、可控性等优点,在心肌保护方面具有更广泛的临床应用前景。多种西药（如:异氟烷、法舒地尔等）的动物实验研究发现,药物后适应通过不同的作用机制而发挥心肌保护作用。中医药千百年来在保护人民生命健康上一直发挥着重要作用,另外由于其多靶点、多环节干预及相对较好的安全性等优势,受到越来越多的重视。急性冠脉综合征属于中医学“胸痹”范畴。本病多因年老体衰、劳倦内伤、久病致使脾胃虚弱,运血无力,血滞心脉,内因多为气虚、阳虚。而外因则是寒邪侵心,过食肥甘厚腻,使心胸阳气痹阻,心脉不通,发为气滞、血瘀、痰浊、寒凝。所以本病的治疗应紧扣气虚、血瘀,通补兼施。以益气活血化瘀为本,使其补而不壅,通而不伤正。芪参益气滴丸的主要组方成分为黄芪、三七、丹参、降香油。其主要功能是益气活血、通脉止痛,是临床治疗冠心病心绞痛的有效方剂。本研究拟通过文献和临床随机、对照、双盲的研究,以芪参益气滴丸为代表药物,观察益气活血中药药物后适应对缺血再灌注损伤的心肌保护作用及介入治疗后患者气虚血瘀证候、生活质量的改善作用。本研究分为第一部分的中药干预心肌缺血再灌注损伤的文献研究和第二部分的益气活血中药药物后适应对缺血再灌注损伤心肌保护作用的临床研究。文献研究主要是中药药物后适应对急性心肌梗死PCI患者再灌注损伤心肌保护作用的Meta分析。方法:计算机检索关于中药药物后适应对减轻急性心肌梗死患者经急诊PCI后的再灌注损伤作用的随机对照试验（randomized controlled trial,RCT）。文献检索起止时间均从建库至2014年3月。由2名研究者按纳入与排除标准选择文献、提取资料、交叉核对,而后进行Meta分析。结果:共纳入9个RCT。2个RCT的Meta分析示:中药组CK-MB峰值与对照组相比有统计学差异[MD=63.91,95%CI（46.74,81.08）,P<0.00001]。3个RCT的Meta分析显示:中药组再灌注心律失常发生率低于对照组[OR=0.5,95%CI（0.29,0.87）,P=0.01]。对 PCI 术后 2 小时、24 小时、7 天 ST 段回落率的Meta 分析:PCI 术后 2 小时[OR=1.22,95%CI（0.75-1.96）,P=0.42],中药组与对照组无统计差异。PCI 术后 24 小时[OR=2.32,95%CI（1.50-3.58）,P=0.0002],PCI 术后 7 天[OR=3.54,95%CI（1.53-8.20）,P=0.003],两组间差异有统计学意义。对PCI术后左心室射血分数的影响,中药组与对照组相比有统计学差异[MD=-4.26,95%CI（-7.38,-1.15）,P=0.007]。在不良事件方面,3个研究的Meta分析,不良事件两组无统计学意义[OR=1.46,95%CI（0.54,3.91）,P=0.46]。结论:对急性心肌梗死行急诊PCI术患者,术前给予中药治疗,有利于降低CK-MB峰值及再灌注心律失常发生率,并能提高ST段回落率及左心室射血分数。受纳入研究质量与数量限制,上述结果尚待更多高质量研究来证实。临床研究资料与方法:研究对象为急性冠脉综合征首次接受冠脉介入治疗术患者60例,严格遵循制定的纳入和排除标准。诊断均符合中国急性冠脉综合征的诊断和治疗指南。随机分为治疗组30例（口服芪参益气滴丸）,对照组30例（口服等量安慰剂）,两组西药治疗均严格按指南常规。观察期间所有入选病例不应用其他中药制剂,疗程为4周。收集临床入选病例的基本资料,主要评价指标有:术后第4周进行西雅图心绞痛量表问卷、生活质量简明评价量表和气虚血瘀证候积分调查（见附录）,评价术后心绞痛情况及生活质量;心电图和超声心动图评价心功能;心肌酶谱标志物检测,评价心肌破坏程度;氧自由基检测,评价再灌注损伤;炎症因子检测,评价对急性冠脉综合症病理基础动脉粥样硬化的影响;术后4周检验凝血功能指标,观察患者凝血机制的变化;以血常规、尿常规、便常规、肝肾功能等检查作为安全性指标。临床研究结果:1、心绞痛情况以及生活质量评价:西雅图心绞痛量表（SAQ）结果显示在两组患者治疗前以及PCI术后4周此量表对患者进行测试,将回答问题记录在CRF表上,将各项计分。两组患者治疗前AS、AF、TS、DP四项指标计分差异无统计学意义（P>0.05）;两组患者治疗后AS、AF、TS、DP四项指标评分均高于治疗前,差异具有统计学意义（P<0.05）;且治疗组较对照组效果更明显,差异具有统计学意义,说明治疗组较对照组心绞痛发作频率少、症状稳定更好、对疾病认识及治疗满意度均有提高。生活质量评价简明量表（SF-12）结果为治疗组与对照组相比,治疗前,两组患者的生活质量无显着差异,P>0.05,无统计学差异。治疗后,治疗组与对照组相比,治疗组患者的生活质量有改善,P<0.05,有统计学意义。2、心绞痛及气虚血瘀证候治疗前后计分结果为:治疗组和对照组在治疗前患者各心绞痛、中医症状、舌脉积分无显着性差异,具有可比性,治疗后两组患者各心绞痛、中医症状、舌脉积分有差异,治疗组优于对照组,说明芪参益气滴丸可减轻患者心绞痛的程度,改善气虚血瘀证候。3、心功能评价:心电图方面治疗组与对照组比较,结果显示:对于NSTEMI、USAP类型的两组患者心电图比较,治疗组有效率分别为（10%、6.6%）,对照组有效率分别为（13.3%,0%）,对于STEMI类型的两组患者心电图比较,治疗组有效率为43.3%,对照组有效率为40%。两组患者治疗后总有效率分别为60%、53.3%,治疗组优于对照组。超声心动图方面两组患者术前左房直径、左室舒张末径、左室射血分数的差异无统计学意义（P>0.05）;两组患者治疗后4周比较左房直径、左室舒张末径差异无统计学意义（P>0.05）;两组患者治疗后4周左室射血分数较治疗前明显增加,差异有统计学意义（P=0.005）。4、心肌酶谱标记物结果比较:治疗组与对照组比较,治疗前两组患者血清心肌酶谱标记物相比,P>0.05,无统计学差异,治疗后两组患者血清心肌酶谱标记物相比,P>0.05,无统计学差异。5、氧自由基检测:治疗前两组患者血清MDA、SOD结果相比,P>0.05,无统计学差异,治疗后两组患者血清MDA、血清SOD结果相比,P<0.05,有统计学差异,说明芪参益气滴丸具有一定的抗氧化应激作用,其抗氧化应激作用主要通过改善血清MDA、SOD实现。6、炎性因子检测:治疗组与对照组相比,治疗前两组患者血清MMP-9、内皮素-1、hs-CRP、脂联素、IL-10结果相比,P>0.05,无统计学差异,治疗后两组患者血清MMP-9、内皮素-1、IL-10结果相比,P>0.05,无统计学差异。但治疗组血清hs-CRP水平低于对照组、而治疗组血清脂联素水平高于对照组,治疗组与对照组结果相比,P<0.05,有统计学差异。7、治疗前后凝血指标检测结果比较:治疗前,Fib在治疗组和对照组之间无差别（P>0.05）。治疗后,Fib较治疗前降低,但两组差别无统计学意义（P>0.05）。8、安全性指标的检测:临床试验中对所有入选患者在治疗前后分别检测了血、尿、便常规,肝功能（ALT、AST）、肾功能（Cr、BUN）,结果显示治疗前后未见明显异常,提示芪参益气滴丸安全性良好。结论:1、Meta分析结果为对急性心肌梗死行急诊PCI术患者,术前给予中药治疗,有利于降低CK-MB峰值及再灌注心律失常发生率,并能提高ST段回落率及左心室射血分数。2、术前给予益气活血类中药治疗,术后第4周进行西雅图心绞痛量表问卷、生活质量简明评价量表和气虚血瘀证候积分调查发现术后心绞痛情况及生活质量有所改善提高;心电图和超声心动图显示心功能有部分改变。3、心肌酶谱标志物检测结果无统计学差异,说明芪参益气滴丸对心肌坏死程度的改善作用不明显;氧自由基检测MDA、SOD含量,治疗前两组患者血清MDA、SOD结果相比,P>0.05,无统计学差异,治疗后两组MDA、SOD水平与对照组相比,P<0.05,有统计学差异,说明芪参益气滴丸具有一定的抗氧化应激作用,其抗氧化应激作用主要通过升高血清SOD、降低MDA水平实现;炎症因子检测,治疗组与对照组相比,治疗后两组患者血清MMP-9、内皮素-1、IL-10结果相比,P>0.05,无统计学差异,但治疗组血清hs-CRP水平低于对照组、而治疗组血清脂联素水平高于对照组,治疗组与对照组血清hs-CRP、脂联素结果相比,P<0.05,有统计学差异,说明芪参益气滴丸具有一定的抗炎作用,其抗炎作用主要通过改善血清hs-CRP、脂联素实现;4、临床试验中对所有入选患者在治疗前后分别检测了血、尿、便常规,凝血功能、肝功能（ALT、AST）、肾功能（Cr、BUN）,结果显示治疗前后未见明显异常,提示黄芪丹参滴丸安全性良好。综上所述,对于急性冠脉综合症患者再灌注治疗,在常规西药治疗的基础上,辅以中药芪参益气滴丸,可以有效地清除氧自由基,抑制炎性反应,改善心功能,减轻症状,提高患者的生活质量,可以作为急性冠脉综合症患者PCI术的一个很好的辅助治疗选择。
赵子粼[10]（2011）在《应用祖细胞动员剂粒细胞集落刺激因子对心梗后心衰患者心功能的影响及其机制》文中研究说明研究背景内皮祖细胞（endothelial progenitor cells, EPCs）是一种来源于骨髓的原始细胞,与人类胚胎时期的成血管细胞（angioblast）和人脐带静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVEC）相似,在一定的条件下可诱导分化成为成熟的内皮细胞。它不仅仅参与胚胎时期的血管生成,而且出生后,在微血管新生、损伤血管内皮修复和功能维持中仍然有重要的作用。近年来,血管相关性疾病发病率逐年上升。在各种致病因素的作用下,血管内皮层的完整性受到破坏,各种物质在血管壁沉积、炎性细胞浸润、血管壁硬化和脆化、血管腔狭窄是其最基本的病理改变。目前的药物治疗和介入治疗均不能完全恢复血管的解剖结构,心血管病还是会随着时间的推移而复发。体内外试验证实,EPCs可以增殖分化为成熟的EPCs,形成管腔样结构,因此EPCs治疗逐渐被应用于血管相关性疾病的治疗,被认为是血管相关性疾病最有前景的治疗措施之—1977年,Asahara等首次报导了从人的外周血中分离出EPCs,从此开始了真正意义上的EPCs的研究时代。随后,Murohara等又在脐带血中发现了CD34+的细胞,在体外诱导可以分化为成熟的EPCs,认为脐带血中也存在EPCs。随着实验技术的不断发展,人们相继在胎儿肝脏、骨髓、动脉血管外膜和脂肪组织中分离出EPCs。实验证实,EPCs不仅在胎儿时对血管生成有重要的作用,对出生后微血管新生和血管内皮维护同样有重要的意义。近年来干细胞技术的出现与成熟,为合并心功能不全的心肌缺血性心脏疾病治疗带来了突破性进展,其中用粒细胞集落刺激因子（granulocyte colony stimulating factor, G-CSF）动员自体骨髓干细胞治疗取得了显着成就。G-CSF是一种多肽细胞生长因子,亦是刺激骨髓细胞集落形成的集落刺激因子的一种,可由斑块内的巨噬细胞、平滑肌细胞（smooth muscular cells, SMCs）、内皮细胞（endothelial cells, ECs）分泌。G-CSF是首个被发现的骨髓造血干细胞强有力的动员剂,已证明具有动员EPCs的作用,同时也能动员间充质干细胞及内皮前体细胞。研究证实,G-CSF在体内、体外均可促进内皮前体细胞的增殖,并能动员内皮前体细胞特异性地向缺血心肌迁移,增加缺血组织的血管新生,单个核细胞分化为内皮细胞的数量增加,EPCs克隆形成亦增多,具有改善组织血流的治疗作用,从而有效促进心功能的恢复,逆转心肌梗死大鼠左室重构,改善预后。因此可以认为G-CSF骨髓干细胞动员既可以促进心肌细胞再生也可以促进梗死区血管再生,从而使心梗后心功能得到改善。与骨髓干细胞移植相比,干细胞动员疗法不需要干细胞的提取、制备,不需要介入手术,该疗法简便易行,便于临床应用。心肌梗死（myocardial infarction, MI）是冠状动脉急性闭塞导致部分心肌缺血性坏死的过程。MI的外科手术、介入治疗等传统治疗手段主要是重建血供,并不能完全修复损伤和再生心肌细胞。近年来,EPCs成为了治疗缺血性心血管疾病的研究热点。EPCs不仅参与人胚胎血管生成,也参与出生后血管新生（angiogenesis）和内皮损伤后的修复过程。随着对EPCs生物学特性的认识及其在急性心肌梗死治疗中研究的不断深入,应用“动员剂”将EPCs从骨髓中动员到外周血中,参与坏死心肌的修复及血管新生,为防治心肌细胞凋亡、心室重构的急性心梗患者提供了新的思路。其具体机制是,当心肌梗死发生时,有少数EPCs受炎性趋化因子的作用被“招募”到心肌缺血部位,参与心肌和血管的再生,但这种作用很微小,不能足以恢复受损伤的心肌,也就不能阻止左室重构的发生及心力衰竭的进展。近几年干细胞动员剂应用于心肌梗死的治疗得到广泛关注。应用动员剂将EPCs从骨髓中动员到外周血中,从而使外周EPCs达到治疗所需的数量,利用其自动归巢（Homing）到梗死区并在心肌微环境下分化的特性,参与坏死心肌的修复及血管新生。在多个已完成的EPCs治疗急性心肌梗死的多样本动物试验中,发现心功能可得到一定程度的改善。心脏的收缩与舒张均为耗能过程,心肌能量学（myocardial energetic, ME）系研究心肌能量、代谢、需氧与供氧平衡和心脏作功关系的一门学科。研究心肌能量代谢状况并进行有效的调节,改善心肌能量代谢水平是治疗缺血性心脏病及抑制心衰进展的有效方法。研究心肌能量代谢状况并进行有效的调节,提高OFR的清除能力,改善心肌能量代谢（myocardial energy expenditure, MEE）水平,纠正血流动力学紊乱是治疗缺血性心脏病及抑制心衰进展的有效方法。EPCs为心梗合并心功能不全的治疗开启了一条崭新的途径,但目前多停留在动物试验阶段,临床研究仍不多,本研究选取心肌梗死后心力衰竭的患者,在标准治疗的基础上应用G-CSF动员EPCs,观察其对炎性因子、抗氧化酶、心肌能量代谢等变化的影响,探讨EPCs改善心功能的可能途径,以期为临床应用提供可靠的依据。一、研究对象和方法1.病例选择：入选标准①年龄75岁以下；②既往有明确的心肌梗死病史至少1个月以上；③逐渐出现心力衰竭临床表现,心功能NYHA分级II-IV级；④彩色多普勒超声心动图证实左心室扩大,室壁节段运动异常,静息状态下左室射血分数（LVEF）<45%。排除标准：心源性休克；严重心律失常；心源性晕厥病史；肝、肾功能不全；有恶性肿瘤及血液系统病史的患者。2.病例与分组对解放军第303医院2008年10月至2010年10月收治的心肌梗死患者进行随访,自满足入选标准起的近4个月内因心衰发作入院的共38例患者纳入研究,男性24例,女性14例,年龄46-75岁,平均（60.89±7.53）岁。25例患有高血压,20例有糖尿病史,21例有高脂血症,16例患者有吸烟嗜好；梗死时间3个月-2年,平均（11±8.46）个月。前间壁梗死9例、前壁梗死10例、广泛前壁梗死10例、下壁梗死6例、后壁梗死3例；术前NYHA心功能分级Ⅲ/Ⅲ/Ⅳ级分别为10/24/4例。在常规治疗的基础上随机分为治疗组和对照组：每组19例。两组患者基本情况均衡,在年龄、性别、合并症、梗死时间部位及治疗用药情况相似,具有可比性。另选19名健康志愿者作为健康组。3.治疗方法治疗组在常规治疗的基础上给予粒细胞集落刺激因子（G-CSF）（商品名：吉粒芬,杭州九源生物基因工程有限公司生产,规格150μg/支）450μg/d皮下注射,连续注射5 d。对照组予以注射同等剂量生理盐水。所有患者在治疗及随访期间根据临床需要给予相应的药物治疗,包括利尿药、硝酸酯类、抗血小板药物、血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）或血管紧张素II受体拮抗剂（ARB）、β受体阻断药、他汀类调脂药物及降血压、降血糖等对症处理。4.外周血血管内皮祖细胞的测定方法两组患者分别于治疗前、治疗后第7天、第14天、第28天、第4个月,清晨空腹抽取外周静脉血8ml,采用密度梯度离心法从受试者外周静脉血中分离单个核细胞,用内皮细胞基础培养基EBM2培养至第7d,分析贴壁细胞。向贴壁细胞中加入乙酰化低密度脂蛋白（Dil-acLDL,2.4 mg/L）,在37℃下孵育1h后,用体积分数为2%多聚甲醛固定细胞10 mmin,固定后用PBS液洗涤2次,再加入豆凝血素Ⅰ（FITC-UEA-I）和乙酰化低密度脂蛋白（Dil-acLDL）在37℃下孵育1h。上述步骤完成后于倒置荧光显微镜下观察,摄取豆凝血素Ⅰ（FITC-UEA-I）和乙酰化低密度脂蛋白（Dil-acLDL）即双染色阳性（黄色荧光）细胞被认为是正在分化的EPCs,红色荧光的为acLDL阳性细胞,绿色荧光的为UEA-I阳性细胞。将EPCs培养于6孔板中,孵育2d时收集未贴壁细胞（包括EPCs）,调整密度为1×106细胞／孔,置入24孔板中,继续培养5d,计数每个样本中每孔的克隆数。5.左室射血分数（LVEF）检测应用GE Logig 7彩色多普勒超声诊断仪,分别于治疗前、治疗后第2周和第4个月行常规超声心动图检测,测左室长轴切面、左室短轴切面、心尖四腔切面,测量左室结构指标：左室射血分数（LVEF）。6.血浆脑钠肽（BNP）浓度测定两组患者分别于治疗前、治疗后第7天、第14天、第28天、第4个月,清晨平卧、空腹、采肘静脉血5m1,用100 g/L乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝,并加入抑肽酶,离心后分离血浆,采用双抗夹心酶联免疫吸附测定（ELISA）法测定血浆脑钠肽浓度(仪器为美国ABBOTT检测仪器1。7.心功能临床疗效评定标准：按NYHA心功能分级标准,心力衰竭纠正或心功能改善二级以上为显效；心功能改善一级为有效；心功能无改善或恶化者为无效。8.心肌能量代谢检测应用GE Logig 7彩色多普勒超声诊断仪,分别于治疗前、治疗后第2周和第4个月行常规超声心动图检测,测左室长轴切面、左室短轴切面、心尖四腔切面,测量左室结构指标如下：短轴缩短率（FS）、左室收缩末期内径（LVIDs）、左室舒张末期容积（EDV）、收缩末期左室后壁厚度（PWTs）、每搏输出量（SV）、射血时间（ET）,各项指标取3个连续心动周期的平均值。在超声检查结束时,记录患者的身高、体重,用袖带血压计测定收缩压。按相关参考公式计算：左心室收缩末圆周室壁应力（circumferential end-systolic wall stress, cESS）代表左室收缩末张力的量度标准：；MEE（无创方法评估心肌生物能量消耗）：MEE（cal/systole）=cESS（kdyn/cm2）×ET（s）×SV（ml）×4.2×10-4。9.炎性因子的测定两组患者均于治疗前及治疗后第7天、28天清晨安静平卧状态下空腹肘静脉采血,采用酶联免疫吸附法检测血浆高敏C-反应蛋白水平（C-reactive protein, CRP）水平,采用放射免疫分析法检测血中白细胞介素-6(interleukin-6, IL-61和肿瘤坏死因子-α（necrotic factor-α, TNF-α）的水平。高敏C-反应蛋白水平检测试剂盒由晶美生物制品有限公司提供,白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α检测试剂盒由北京东亚免疫技术研究所提供。均按试剂盒说明书进行操作。10.抗氧化酶的测定两组患者均于治疗前及治疗后第7天、28天清晨安静平卧状态下空腹肘静脉采血,肝素抗凝,3000r/min离心5min后留取血浆,-80℃保存待测。红细胞即刻用0.9%氯化钠溶液冲洗3次后,进行SOD抽提,留取含有SOD的上清液,-80℃保存。SOD试剂盒由南京建成生物工程研究所提供,按照试剂盒操作步骤进行。用日本产200-20型紫外分光光度计检测MDA水平,药盒由南京生物工程研究所提供。11.统计学方法统计学处理所有资料均采用SPSS13.0统计软件进行处理。计量资料用均数±标准差表示。同组间两均数前后比较采用两独立样本配对t检验,不同组间两均数比较采用两独立样本t检验,检测水平为双侧,相关性方法采用Pearson相关分析,以P<0.05为差异有统计学意义。二、研究结果1.安全性38例心肌梗死患者治疗过程均安全,随访未发现无严重并发症。本研究发现EPCs治疗心梗合并心衰患者最常发生的不良反应为发热,未出现不良的心血管事件,如恶性心律失常、心衰恶化及再发心肌梗死等。治疗组100%患者的血白细胞水平均出现不同程度的升高,予对症处理1-4周逐渐恢复至用药前水平。2.治疗前后外周血EPCs数量的变化两组心肌梗死合并心功能不全患者的外周血EPCs水平均大于健康志愿者的平均水平（P<0.01）；两组患者治疗后EPCs水平均大于治疗前；两组患者相同治疗时间点比较,治疗组EPCs水平均高于对照组,各组比较有统计学差异（P<0.05）；治疗组EPCs水平于第7天达到峰值,增高较对照组及同组其他治疗时间点比较有显着性差异（P<0.01）；随观察时间的延长,EPCs水平呈递减趋势,但治疗组EPCs水平至第4个月仍高于治疗前（P<0.05）；对照组EPCs水平治疗后第3天、第7天较治疗前有统计学意义（P<0.05）,治疗后第14天、第28天、第4个月较治疗前无统计学意义（P>0.05）。3.治疗前后血浆脑利钠肽（BNP）水平变化两组患者血浆脑利钠钛水平各时间点均高于健康志愿者的平均水平15.8±8.7ng/L；两组治疗后血浆BNP水平各时间点均下降,对比治疗前具有显着性差异（P<0.01）；治疗组第7天、第14天、第28天的血浆BNP水平与对照组比较有统计学差异（P<0.05）；两组治疗后第7天、第14天、第28天、第4个月进行组内比较,各时间点无统计学意义（P>0.05）。4.治疗前后左室射血分数（LVEF）变化趋势两组患者治疗第4个月的LVEF水平与治疗前相比较,增加有统计学意义（P<0.05）；治疗组与对照组治疗后第2周、第4个月LVEF均呈增加趋势,但两组间比较无显着性差异（P>0.05）。5.心功能疗效的比较对照组19例患者中显效1例,有效14例,无效4例,总有效率78.9%；治疗组显效2例,有效15例,无效2例,总有效率89.4%。两组间总有效率比较无统计学差异（P>0.05）。6.超声心动图检查结果治疗前后LVIDs变化趋势：两组患者治疗后各时间点的LVIDs水平与治疗前相比较,降低有统计学意义（P<0.05）；治疗组LVIDs水平治疗后第2周和第4个月与对照组比较,降低有统计学（P<0.05）；治疗前后EDV变化趋势：两组患者治疗EDV水平与治疗前相比较有所降低,但无统计学意义（P>0.05）；治疗前后SBP变化趋势：两组患者治疗后各时间点的SBP水平与治疗前相比较,均无统计学意义（P>0.05）；治疗组治疗后第2周和第4个月与对照组比较,降低也无统计学（P>0.05）；治疗前后PWTs变化趋势：两组患者治疗后各时间点的PWTs水平与治疗前相比较,降低无统计学意义（P>0.05）；治疗组PWTs水平治疗后第2周和第4个月与对照组比较,降低无统计学（P>0.05）；治疗前后ET变化趋势：两组患者治疗后各时间点的ET水平与治疗前相比较,减少有统计学意义（P<0.05）；治疗组ET水平治疗后第4个月与对照组比较,减少有统计学意义（P<0.05）；治疗前后SV变化趋势：两组患者治疗后各时间点的SV水平第4个月与治疗前相比较,增多有统计学意义（P<0.05）；治疗组SV水平治疗后与对照组比较,增多无统计学意义（P>0.05）；治疗前后FS变化趋势：两组患者治疗后第4个月的FS水平与治疗前相比较,增加有统计学意义（P<0.05）；治疗组治疗后第2周与对照组比较,增加无统计学意义（P>0.05）；治疗组FS水平治疗后第4个月与对照组比较,增加有显着性差异（P<0.01）。7.心肌能量消耗检测结果治疗前后cESS变化趋势：两组患者治疗后各时间点的cESS水平与治疗前相比较,降低有统计学意义（P<0.05）,治疗组治疗后第2周与对照组比较,降低无显着性差异（P>0.05）,治疗组cESS水平治疗后第4个月与对照组比较,降低有统计学意义（P<0.05）；治疗前后MEE变化趋势：两组患者治疗后各时间点的MEE水平与治疗前相比较,降低有统计学意义（P<0.05）；治疗组治疗后第2周与对照组比较,降低无显着性差异（P>0.05）；治疗组MEE水平治疗后第4个月与对照组比较,降低有统计学意义（P<0.05）。8.炎性因子检测结果心肌梗死合并心衰患者血清CRP、TNF-α、IL-6升高较健康志愿者有统计学意义（P<0.05）。与治疗前相比,两组治疗后血清CRP. TNF-α、IL-6有所降低,有统计学意义（P<0.05）,其中治疗组第7天CRP较对照组下降有显着性差异（P<0.01）。9.抗氧化酶酶测定结果两组患者治疗后心肌组织中SOD活性提高,LPO. MDA的生成减少（P<0.05）,治疗组变化优于对照组,有统计学意义（P<0.05）。三、结论：1.EPCs动员剂G-CSF治疗MI合并心功能不全患者安全有效；可以明显增加患者EPCs数量、提高EPCs功能；同时可部分提高左室射血分数,降低血浆BNP水平,增加心输出量,射血时间具有缩短趋势,心脏收缩功能得到部分改善；对心肌能量代谢具有明显改善作用、降低心肌生物能量消耗。2.EPCs动员剂G-CSF治疗心梗后心衰患者,可进一步降低CRP水平,抑制炎症反应,减轻心肌损害；同时可能进一步增强抗氧化酶活性,提高氧自由基清除能力。
二、血清SOD LPO及心肌酶的测定对治疗小儿心功能衰竭的临床意义(摘要)（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、血清SOD LPO及心肌酶的测定对治疗小儿心功能衰竭的临床意义(摘要)（论文提纲范文）
（1）双参宁心胶囊调控线粒体自噬抗小型猪心肌缺血再灌注损伤机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 第一部分 文献研究 |
| 综述一 基于线粒体自噬探讨益气活血法防治缺血性心脏病的研究进展 |
| 1. 缺血性心脏病概述 |
| 2. 线粒体自噬 |
| 3. 线粒体自噬的分子机制 |
| 4. 线粒体自噬与缺血性心脏病 |
| 5. 益气活血类中药对自噬的干预 |
| 6. 展望与结论 |
| 参考文献 |
| 综述二 Pink1/Parkin通路相关研究进展 |
| 1. PINK1/Parkin的分子机制 |
| 2. PINK1/Parkin介导的线粒体自噬 |
| 3. PINK1/Parkin介导的线粒体自噬与相关性疾病 |
| 4. 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 附件 |
| 第二部分 双参宁心胶囊对小型猪心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 3. 实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 小结 |
| 第三部分 双参宁心胶囊对小型猪心肌缺血再灌注损伤线粒体自噬作用机制研究 |
| 1. 村料 |
| 2. 方法 |
| 3. 实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）基于Nrf2/HO-1信号通路探讨参附注射液改善心肺复苏后大鼠心肌细胞氧化应激损伤的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 |
| 1 实验目的 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 指标的检测 |
| 5 统计学分析 |
| 6 结果 |
| 第二部分 讨论 |
| 1 心脏骤停与复苏后综合征 |
| 2 治疗复苏后心功能不全的研究现状 |
| 3 Nrf2/H0-1信号通路在心肌缺血再灌注损伤中的保护作用 |
| 4 参附注射液在复苏后综合征的研究进展 |
| 5 结果分析 |
| 结论 |
| 本研究的创新之处 |
| 本研究的不足之处 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词 |
| 综述 参附注射液在心血管系统中保护作用机制的研究进展 |
| 1 参附注射液对心血管系统保护作用机制 |
| 2 参附注射液对心血管系统的药理作用 |
| 3 参附注射液在心血管疾病中的研究 |
| 4 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历及攻读学位期间获得的科研成果 |
（3）基于Nrf2/HO-1通路探讨益脉颗粒对高脂合并MIRI大鼠心肌损伤的影响及机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 论文一 益脉颗粒对高脂合并MIRI大鼠心肌损伤的保护作用 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文二 益脉颗粒对高脂合并MIRI大鼠心肌相关炎症因子的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文三 益脉颗粒通过Nrf2/HO-1 通路影响高脂合并MIRI大鼠的氧化应激和细胞凋亡 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（4）刺五加注射液对心脏毒性和脑缺血损伤的保护作用和机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、刺五加注射液改善阿霉素诱导大鼠心脏收缩功能下降的作用研究 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 药品与试剂 |
| 1.1.2 动物 |
| 1.1.3 仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 模型制备与分组给药 |
| 1.2.2 多普勒心脏收缩功能及构型测定 |
| 1.2.3 左室压最大上升速率(+LVdp/dt_(max))测定 |
| 1.2.4 氧化应激因子的测定 |
| 1.2.5 凋亡及凋亡相关蛋白测定 |
| 1.2.6 电镜心脏超微结构观察 |
| 1.2.7 统计方法 |
| 1.3 实验结果 |
| 1.3.1 对大鼠心脏收缩功能的影响 |
| 1.3.2 对大鼠左室构型的影响 |
| 1.3.3 对大鼠心肌组织凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响 |
| 1.3.4 对大鼠氧化应激因子的影响 |
| 1.3.5 对大鼠心肌组织超微机构的影响 |
| 1.4 实验讨论 |
| 1.5 实验小结 |
| 二、刺五加注射液对脑缺血损伤的保护作用研究 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 药品与试剂 |
| 2.1.2 动物 |
| 2.1.3 仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 模型制备 |
| 2.2.2 分组与给药 |
| 2.2.3 神经功能缺陷评分 |
| 2.2.4 脑梗死范围测定 |
| 2.2.5 脑水肿测量 |
| 2.2.6 血小板聚集功能和凝血参数测定 |
| 2.2.7 氧化应激因子检测 |
| 2.2.8 炎性因子检测 |
| 2.2.9 TXB2、6-k-PGF1α、NO检测 |
| 2.2.10 统计方法 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 对大鼠神经功能的影响 |
| 2.3.2 对大鼠脑梗死范围的影响 |
| 2.3.3 对大鼠脑水肿的影响 |
| 2.3.4 对大鼠血小板聚集功能的影响 |
| 2.3.5 对大鼠凝血参数的影响 |
| 2.3.6 对大鼠氧化应激因子的影响 |
| 2.3.7 对大鼠炎症因子的影响 |
| 2.3.8 对大鼠TXB2、6-k-PGF1α、NO的影响 |
| 2.4 实验小结 |
| 2.5 实验讨论 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 附录 |
| 综述 化疗药物对心肌收缩功能影响及治疗策略研究进展 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（5）基于TLR4/MAPKs/NF-κB信号通路和钙通道的6-姜酚心肌保护作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 6-姜酚对心肌纤维化小鼠的保护作用及机制研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 6-姜酚对H9c2心肌细胞缺氧损伤的保护作用及机制研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 6-姜酚对大鼠心肌细胞L-型钙通道、收缩力及钙瞬变的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述一 生姜活性成分及药理作用研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 抗心肌缺血中药有效成分研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（6）芪冬颐心口服液防治化疗心脏毒性及其改善心气虚证的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一章 文献综述 |
| 第一节 抗肿瘤药物心脏毒性相关研究进展 |
| 1 抗肿瘤药物心脏毒性机制研究 |
| 2 不同类别抗肿瘤药物心脏毒性临床研究进展 |
| 3 抗肿瘤药物心脏毒性的监测方法研究进展 |
| 4 抗肿瘤药物心脏毒性预防与治疗研究进展 |
| 5 总结 |
| 6 参考文献 |
| 前言 |
| 第二章 实验研究 |
| 第一节 芪冬颐心口服液对阿霉素导致小鼠心脏毒性保护作用研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 参考文献 |
| 第二节 芪冬颐心口服液对阿霉素诱导肿瘤小鼠心脏毒性与抑瘤作用研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 参考文献 |
| 第三章 临床研究 |
| 1 研究目的 |
| 2 研究设计 |
| 3 临床资料 |
| 4 讨论 |
| 5 参考文献 |
| 结语 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简历 |
（7）基于JAK/STAT信号通路探讨养心活血解毒方对病毒性心肌炎心肌损伤的保护作用（论文提纲范文）
| 提要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一部分 文献回顾 |
| 一、古代医家对病毒性心肌炎中医病名病因病机的认识 |
| (一) 病名追溯 |
| (二) 病因病机认识 |
| 二、现代医家对病毒性心肌炎病机治法的认识 |
| (一) 病毒性心肌炎诊断及中医病因 |
| (二) 病机研究 |
| (三) 病毒性心肌炎治疗方法 |
| 三、现代医家对病毒性心肌炎发病机制的认识 |
| (一) 病毒对心肌的直接损伤 |
| (二) 免疫机制介导的心肌损伤 |
| (三) 心肌纤维化 |
| 四、心肌组织JAK/STAT通路研究进展 |
| (一) JAK/STAT信号通路的组成 |
| (二) JAK/STAT信号通路的活化与调控 |
| (三) 心肌JAK/STAT信号通路的生理生理学意义 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验一 养心活血解毒方对病毒性心肌炎小鼠心肌损伤的保护作用 |
| 一、实验材料与方法 |
| (一) 实验材料 |
| (二) 实验方法 |
| 二、结果 |
| (一) 小鼠一般情况 |
| (二) 生存情况 |
| (三) 体重变化 |
| (四) 对小鼠血清CK-MB水平的影响 |
| (五) 对小鼠血清LDH水平的影响 |
| (六) HE染色观察各组小鼠的病理变化 |
| 实验二 养心活血解毒方对病毒性心肌炎小鼠心肌组织JAK/STAT通路的干预效应 |
| 一、实验材料与方法 |
| (一) 实验材料 |
| (二) 实验方法 |
| 二、结果 |
| (一) ELISA检测各组小鼠血清IL-6、IL-10的含量 |
| (二) 免疫组化法测定心肌组织FAS、FASL蛋白阳性表达 |
| (三) Western Blot检测心肌组织JAK2、STAT3蛋白的表达 |
| 讨论 |
| 一、病机讨论 |
| (一) 气阴两虚 |
| (二) 热毒 |
| (三) 瘀血 |
| 二、组方配伍及方药分析 |
| (一) 组方依据及方解分析 |
| (二) 中药溯源及现代药理分析 |
| 三、疗效及机理分析 |
| (一) 各对小鼠一般情况、生存情况、体重变化的影响 |
| (二) 调节心肌酶谱水平 |
| (三) 对心肌组织形态学的影响 |
| (四) 对小鼠血清IL-6、IL-10含量的影响 |
| (五) 对小鼠心肌组织FAS、FASL表达的影响 |
| (六) 对小鼠心肌组织JAK2、STAT3蛋白的影响 |
| 结语 |
| 创新性和不足之处 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 英汉缩略语名词对照 |
| 致谢 |
| 查新报告 |
| 发表论文 |
（8）磷酸肌酸钠、维生素C联合抗病毒治疗对病毒性心肌炎患儿心肌损伤的保护作用（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 治疗方法 |
| 1.3 观察指标 |
| 1.3.1 血清学指标 |
| 1.3.2 超声心动图 |
| 1.4 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 心肌损伤标志物 |
| 2.2 超声心动图参数 |
| 2.3 炎症因子 |
| 2.4 氧化/抗氧化指标 |
| 3 讨论 |
（9）芪参益气滴丸后适应对急性冠脉综合征患者心肌保护作用的临床研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要英文缩略词 |
| 前言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 研究一 心肌缺血再灌注损伤的古代文献研究 |
| 1 病名及临床表现 |
| 2 病因病机 |
| 3 辨证论治 |
| 4 总结 |
| 研究二 心肌缺血再灌注损伤的现代文献研究 |
| 1 心肌缺血再灌注损伤的发生机制 |
| 2 心肌缺血再灌注损伤的防治研究进展 |
| 3 总结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 系统评价 |
| 1 资料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 临床研究 |
| 1 研究目的和意义 |
| 2 研究内容与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 6 特色创新点及展望 |
| 参考文献 |
| 在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
| 附录 |
（10）应用祖细胞动员剂粒细胞集落刺激因子对心梗后心衰患者心功能的影响及其机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 应用祖细胞动员剂对心梗后心衰患者心功能和心肌能量代谢的影响 |
| 引言 |
| 1 资料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 应用祖细胞动员剂对心梗后心衰患者炎性因子和抗氧化酶影响的研究 |
| 引言 |
| 1 资料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 缩写词中英文对照表 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文 |
| 致谢 |
| 统计学证明 |
四、血清SOD LPO及心肌酶的测定对治疗小儿心功能衰竭的临床意义(摘要)（论文参考文献）
- [1]双参宁心胶囊调控线粒体自噬抗小型猪心肌缺血再灌注损伤机制研究[D]. 贾飞凡. 中国中医科学院, 2021(02)
- [2]基于Nrf2/HO-1信号通路探讨参附注射液改善心肺复苏后大鼠心肌细胞氧化应激损伤的研究[D]. 贾思. 广西中医药大学, 2021
- [3]基于Nrf2/HO-1通路探讨益脉颗粒对高脂合并MIRI大鼠心肌损伤的影响及机制[D]. 李全生. 辽宁中医药大学, 2019(01)
- [4]刺五加注射液对心脏毒性和脑缺血损伤的保护作用和机制研究[D]. 张珊. 天津医科大学, 2019(02)
- [5]基于TLR4/MAPKs/NF-κB信号通路和钙通道的6-姜酚心肌保护作用及机制研究[D]. 韩雪. 河北中医学院, 2019(01)
- [6]芪冬颐心口服液防治化疗心脏毒性及其改善心气虚证的研究[D]. 祁烁. 北京中医药大学, 2018(08)
- [7]基于JAK/STAT信号通路探讨养心活血解毒方对病毒性心肌炎心肌损伤的保护作用[D]. 劳慧敏. 山东中医药大学, 2017(08)
- [8]磷酸肌酸钠、维生素C联合抗病毒治疗对病毒性心肌炎患儿心肌损伤的保护作用[J]. 李彩虹. 海南医学院学报, 2016(20)
- [9]芪参益气滴丸后适应对急性冠脉综合征患者心肌保护作用的临床研究[D]. 罗敏. 北京中医药大学, 2014(01)
- [10]应用祖细胞动员剂粒细胞集落刺激因子对心梗后心衰患者心功能的影响及其机制[D]. 赵子粼. 南方医科大学, 2011(05)