固相酶免疫法测定人血清中游离三碘甲状腺原氨酸

一、固相板酶免法测定人血清游离三碘甲状腺原氨酸（论文文献综述）

李小花,王海雁,刘荔贞,费鹏,王俊烽,杨嘉晖^[1]（2019）在《化学发光免疫分析技术在医学中的应用》文中指出化学发光免疫分析技术（CLIA）是把免疫反应和化学发光检测方法结合的一种分析技术。其免疫反应的特异性和灵敏度都很高。CLIA是在酶联免疫分析、放射免疫分析和荧光免疫分析后面发展起来的一种检测技术。由于其具有操作简单,标记方便,稳定度和检测灵敏度高,速度快,对环境没有污染等优点在临床上受到医学检验者和医生的一致好评。

章洁淳^[2]（2017）在《COPD患者血清甲状腺激素水平变化及其与肺功能、中医辨证分型的相关性》文中指出目的:探讨慢性阻塞性肺疾病（Chronic obstructive pulmonary disease,COPD）患者急性加重期与稳定期血清甲状腺激素水平的变化特点及其与肺功能、中医辨证分型的相关性,以进一步探讨COPD患者甲状腺功能的变化特点、相应中医证型病因病机及其与患者肺通气功能的影响,为中西医结合诊治COPD提供可行的思路。方法:1.研究对象1.1 AECOPD组共收入2016年6月至2017年2月于广州中医药大学第一附属医院因急性加重住院治疗的COPD患者53例,COPD的诊断符合2013年中华医学会制定的COPD诊治指南,经肺功能检查证实有不完全可逆的气道阻塞;排除合并有影响代谢的其它疾病,如原发性内分泌系统疾病（甲状腺分泌疾病等）、结核活动、恶性肿瘤、糖尿病及肝、肾功能不全等;且能配合进行肺功能检查者。1.2稳定期COPD组上述AECOPD患者经规范治疗后进入稳定期者,计划纳入53例,其中因病情变化或患者个人因素而退出测试者13例,实际共40例。1.3对照组30例,均来自广州中医药大学第一附属医院健康体检人群。经病史、查体及辅助检查,无心、脑、肺、肾及内分泌系统等影响实验结果的相关疾病,而且参与实验者近两个月内无全身感染史。2.血清甲状腺激素（TSH、FT3、FT4、TT3、TT4）的测定所有研究对象于清晨空腹采取肘静脉血8ml注入到干燥的标准试管中,用台式离心机以3500转/分离心15min,分离得血清,采用微粒子发光法测定血清游离三碘甲状腺素（FT3）、游离甲状腺素（FT4）、总三碘甲状腺素（TT3）、总甲状腺素（TT4）及促甲状腺激素（TSH）的浓度。3.肺功能测定对稳定期COPD组使用肺功能仪进行肺功能测定。主要测定指标为:①用力肺活量（FVC）;②第一秒用力呼气容积占预计值的百分比（FEV1%）;③第一秒用力呼气容积与用力肺活量的比值（FEV1/FVC%）。并依据GOLD指南COPD严重程度分级将观察组患者肺功能水平分为轻度、中度、重度、极重度四个级别,分别以Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ表示。4.统计学处理统计学分析在SPSS20.0软件上完成。数据资料以X 士 S表示,构成比比较采用卡方检验、两组资料进行方差分析,组间比较采用t检验,以P<0.05作为差异显着性界值。定量资料之间关联性分析采用线性相关分析、定量资料与等级资料之间关联性分析采用秩相关分析。结果:1.一般资料比较AECOPD组共53例,其中男40例,女13例,平均年龄72±7.4岁,稳定期COPD组共40例,其中男28例,女12例,平均年龄72.5±7.7岁,对照组共30例,其中男24例,女6例,平均年龄71±7.6岁。采用卡方检验比较各组性别构成比无明显差异,t检验比较各组年龄均数无明显差异。2.肺功能指标测定结果肺功能分级为Ⅰ级者共2例（占稳定期COPD组3.8%）,Ⅱ级者共10例（占稳定期COPD组18.9%）,Ⅲ级者共30例（占稳定期COPD组56.6%）,Ⅳ级者共11例（占稳定期 COPD 组 20.8%）。平均 FEV1%为 43.95 ±13.97,平均 FVC%为 59.89 ±13.57。肺功能分级无论在AECOPD组和稳定期COPD组中的中医证型分布上均无差异（P>0.05）。3.中医证型分布特点急性加重期证型主要有痰热壅肺（共20例,占观察组37.7%）、痰浊阻肺（共33例,占观察组62.3%）,稳定期证型有肺气虚（共6例,占11.3%）、肺脾气虚（共31例,占58.5%）、肺肾气虚（共16例,占30.2%）。4.血清甲状腺激素测定结果AECOPD组与对照组血清TT3、FT3、FT4浓度差异有统计学意义（P<0.01）,TSH、TT4浓度两组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。稳定期COPD组与对照组血清TT3、FT3、FT4浓度差异有统计学意义（P<0.01）,TSH、TT4浓度两组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。AECOPD组与稳定期COPD组血清TSH、TT4、TT3、FT3、FT4差异无统计学意义（P>0.05）。AECOPD组不同中医证型之间血清甲状腺激素水平差异无统计学意义（P>0.05）。稳定期COPD组肺气虚证者血清TT3水平高于肺脾气虚者（P<0.01）,TSH、TT4、FT3、FT4差异无统计学意义（P>0.05）;稳定期COPD组肺气虚证者血清FT4水平高于肺肾气虚者（P<0.05）,TSH、TT4、FT3、TT3差异无统计学意义（P>0.05）;肺脾气虚与肺肾气虚者血清TSH、TT4、TT3、FT3、FT4差异无统计学意义（P>0.05）。稳定期COPD组肺功能分级为Ⅱ级与Ⅲ级者血清TSH浓度两组间比较差异有统计学意义（P<0.05）,TT4、TT3、FT3、FT4差异无统计学意义（P>0.05）。余不同级别肺功能分组间两两比较血清TSH、TT4、TT3、FT3、FT4差异无统计学意义（P>0.05）。5.稳定期COPD组血清甲状腺激素与其肺功能分级之间的相关性稳定期COPD组血清TSH与其肺功能分级呈负相关关系、FEV1%呈正相关关系（r=-0.32、0.32,P<0.05）,TT3、TT3、TT4、FT4则与肺功能分级无明显相关性。结论:1.AECOPD组与稳定期COPD组血清TT3、FT3、FT4浓度均明显低于正常对照组,TSH、TT4则无明显差异。AECOPD组与稳定期COPD组血清TSH、TT4、TT3、FT3、FT4无明显差异。提示COPD患者存在甲状腺激素分泌紊乱。2.中医辨证上急性加重期以邪实为主,主要为痰邪致病;稳定期以正虚为主,主要为肺脾肾气虚,且多以肺脾气虚为主,提示COPD发病的中心环节为肺主气及脾主运化水湿之功能失调,辨证治疗上可以调脾肺之气为中心,辅以清化痰邪之法。3.AECOPD组不同中医证型间血清甲状腺激素水平无明显差异。稳定期COPD组肺气虚证者血清TT3水平高于肺脾气虚及肺肾气虚者;血清FT4水平低于肺肾气虚者;肺脾气虚与肺肾气虚者血清TSH、TT4、TT3、FT3、FT4无明显差异。稳定期COPD组不同肺功能分级间TSH水平有差异,TT4、TT3、FT3、FT4则无明显差异。稳定期COPD组TSH与肺功能分级呈负相关关系、与FEV1%呈正相关关系,提示甲功异常的严重程度与COPD严重程度及中医辨证所累及脏器的多寡可能密切相关,测定血清甲状腺素浓度可辅助评价COPD严重程度并为中医准确辨证施治提供参考作用。

孔海霞^[3]（2012）在《人三碘甲腺原氨酸抗体的制备和检测方法的建立及其方法学评价》文中提出游离三碘甲腺原氨酸（free3,5,3’-triiodothyronine，FT3）是甲状腺激素之一，因浓度不受结合蛋白的影响，可以直接反应甲状腺功能，检测人血清中的FT3是诊断甲状腺功能亢进的直接指标。但是目前，临床检测FT3仍依赖于进口仪器和试剂，价格昂贵，制约了其应用范围。目的：制备T3完全抗原，将其免疫大白兔，制备抗人T3多克隆抗体，应用异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate，FITC）系统开发新型非均衡竞争技术，建立一种能广泛应用于临床检测FT3的方法，并进行方法学评价；用制备的T3完全抗原免疫Balb/c小鼠，制备T3单克隆抗体，为进一步建立人血清T3检测方法以及研究T3的生物学作用提供基础。方法：1、应用碳二亚胺法将T3纯品分别与牛血清白蛋白、牛血清γ球蛋白偶联，制备完全抗原。2、以T3-牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）为抗原免疫新西兰大白兔，制备抗人T3多克隆抗体。3、用辣根过氧化物酶（horse radish peroxidase，HRP）标记自制的抗人T3多克隆抗体，用FITC标记T3类似物-BGG。采用抗FITC抗体包被发光板，FITC-BGG-T3类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原，通过非均衡竞争法原理，固相抗原与血清中FT3竞争结合抗T3抗体-HRP，通过标准曲线计算FT3浓度，建立方法学评价并与直接用T3-牛血清γ球蛋白（Bovine serum gamma globulin,BGG）包被（非FITC系统）的检测系统相比较。将本方法应用于临床120份血清标本的检测，定量结果与Roche2010电化学发光全自动免疫分析系统（Elecsys2010）定量结果进行比较。4、以T3-牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）为抗原免疫Balb/c小鼠，以50%的聚乙二醇为融合剂将免疫后小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合，经克隆化、有限稀释筛选，建立能稳定表达抗T3的杂交瘤细胞株，并通过小鼠体内诱生法制备大量的单克隆抗体。纯化制备的单克隆抗体，并从纯度、效价、亚型等方面对其进行鉴定。结果：1、抗体经酶联免疫吸附实验证明对T3具有高度特异性。2、应用FITC系统建立的非均衡竞争化学发光免疫分析标准曲线的线性R>0.99，线性范围0.2550pg/mL，分析灵敏度为0.25pg/mL，精密度测试批内、批间变异系数CV<5%，检测结果优于非FITC系统的检测。对于临床血清标本的检测，其定量结果与Roche Elecsys2010定量试剂盒的定量结果具有很好的相关性，相关系数R=0.9622，两者的测定值无显着性差异（P>0.05）。3、应用杂交瘤技术，建立了2株能稳定分泌抗T3单克隆抗体的细胞株，将其中一株细胞株注射入小鼠腹腔，制备了富含抗T3单克隆抗体腹水。纯化后抗体的效价为1:32000，属于IgG1型。结论：1、应用偶联技术成功制备了T3完全抗原，并以此为免疫原制备了兔抗人T3多克隆抗体，及鼠抗人T3单克隆抗体。2、以FITC系统为平台建立的非均衡竞争FT3检测化学发光法具有精密性好、灵敏度高、稳定性强，有良好的准确性，达到临床测定的需求。

冯秋霞^[4]（2008）在《血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C水平与甲状腺功能相关性研究》文中研究指明目的:本研究通过观察人和大鼠在甲状腺功能亢进（以下简称甲亢）和甲状腺功能减退（以下简称甲减）状态下血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cystatin C,Cys C）水平的变化,探讨血清Cys C水平与甲状腺功能的相关性。方法:临床试验:对临床怀疑为甲亢或甲减的患者和健康对照者采用电化学发光法测定其血清FT3、FT4和TSH浓度以明确诊断,采用乳胶增强免疫散射比浊法测定36例甲亢、34例甲减患者和34例健康对照者的血清Cys C浓度,并观察了甲亢和甲减患者经治疗病情缓解后的血清Cys C浓度,采用直线相关分析法分析血清Cys C水平与甲状腺功能的相关性。动物实验:将32只大鼠随机分为甲亢组（n=12）、甲减组（n=10）和对照组（n=10）,于每日8:30 am,甲亢组大鼠灌胃给予甲状腺素片10μg,共10天,然后停药20天,甲减组大鼠灌胃给予抗甲状腺药物10 mg,共10天,然后停药20天,在用药前和用药后第1、3、7、10天和停药后第20天的8:30 am通过眼内眦静脉采集血液标本2ml,对照组大鼠灌胃给予生理盐水1ml,处理同甲亢和甲减组大鼠,分离血清,-20℃低温保存,采用酶免法测定大鼠血清Cys C水平。结果:临床试验:甲亢组患者的血清Cys C浓度较健康对照组明显升高（P＜0.001）;甲减组患者的血清Cys C浓度较健康对照组明显降低（P＜0.01）。经药物治疗后,甲亢组患者的血清Cys C浓度较治疗前明显降低（P＜0.001）;甲减组患者的血清Cys C浓度较治疗前明显升高（P＜0.01）,两组均恢复至对照组水平（P＞0.05）。直线相关回归分析结果表明,血清Cys C浓度与血清FT3和FT4浓度呈显着正相关（FT3:r=0.791,P＜0.001;FT4:r=0.796,P＜0.001）,与血清TSH浓度呈显着负相关（r=-0.511,P＜0.001）。动物实验:甲亢组大鼠于给药1天时的血清Cys C水平较对照组大鼠明显升高（P＜0.05）,但在给药后第3、7、10天和停药后第20天时,血清Cys C水平与对照组大鼠比较无明显统计学差异（P＞0.05）;与给药前比较,甲亢组大鼠于给药后第1天时的血清Cys C水平明显升高（P＜0.05）,但给药后第3、7、10天和停药后第20天时的血清Cys C水平无明显统计学差异（P＞0.05）。甲减组大鼠给药后第1、3、7、10天和停药后第20天时的血清Cys C水平与对照组大鼠比较无明显统计学差异（P＞0.05）,与给药前比较也无明显统计学差异（P＞0.05）。结论:甲状腺功能异常对人血清Cys C水平有明显的影响,即血清Cys C水平随甲状腺功能增强而升高,反之降低,与血清FT3和FT4浓度呈显着正相关,与血清TSH浓度呈显着负相关。甲状腺素片可使大鼠血清Cys C水平一过性升高;抗甲状腺药物对其则无影响,FT3、FT4和/或TSH可能对细胞产生、分泌Cys C有调控作用,临床上用血清Cys C评价肾功能时需考虑其甲状腺功能是否正常。

乔玲,李雪晶,张墨玲,赵学勤,张镜宇^[5]（2003）在《固相板酶免法测定人血清游离三碘甲状腺原氨酸》文中指出目的 :探讨游离三碘甲状腺原氨酸 （FT3）的酶免疫测定法对于诊断甲状腺功能亢进和监测甲状腺激素补充治疗效果及预后情况的重要意义。方法 :采用聚苯乙烯96孔板作为固相载体 ,利用亲和纯化的兔抗T3 抗体和T3 - β-半乳糖苷酶标记物 ,建立了固相板竞争法。结果 :可测范围为0.48～45.0ng/L ,灵敏度0.13ng/L ,平均批内变异系数为 （n=20）6.4 % ,平均批间变异系数为 （n=8）12.4% ,正常参考范围4.14±0.97ng/L。正常人与甲亢病人能明显分开。结论 :酶免法测定血清FT3,其灵敏度、精密度均达到放免水平 ,且可避免同位素污染

乔玲,张墨玲,赵学勤,张镜宇^[6]（2003）在《固相酶免疫分析用于血清FT3检测探讨》文中研究指明目的 研究血清游离三碘甲状腺原氨酸 （FT3）测定的固相酶免疫分析方法。方法 用聚苯乙烯固相载体、亲和纯化的兔抗 T3抗体和 T3-β-半乳糖苷酶标记物建立固相管竞争法、固相板竞争法和固相板顺序饱和法。通过对酶标物进行化学修饰、减少标准品或待测样品的上样量、扩大反应体系和采用顺序饱和法 ,避免或减少甲状腺激素结合蛋白 （TBP）的干扰。结果 3种方法的可测范围均为 0 .4 8～ 4 5 .0 0 ng/ L ,其正常值分别为 （4.34± 1.0 3） ,（4.14± 0 .97） ,（4.0 3± 0 .82 ） ng/ L。正常人与甲状腺功能亢进症患者能明显分开。 3种方法的灵敏度分别为 0 .15 0 ,0 .130 ,0 .0 4 5 ng/ L ,平均批内变异系数分别为 6 .2 % ,6 .4 % ,5 .2 % ,平均批间变异系数分别为13.1% ,12 .4 % ,11.0 %。结论 固相酶免疫分析法基本解决了 TBP的干扰 ,其测定结果的灵敏度和精密度均达到放射免疫分析法 （RIA）的水平

二、固相板酶免法测定人血清游离三碘甲状腺原氨酸（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、固相板酶免法测定人血清游离三碘甲状腺原氨酸（论文提纲范文）

（1）化学发光免疫分析技术在医学中的应用（论文提纲范文）

（2）COPD患者血清甲状腺激素水平变化及其与肺功能、中医辨证分型的相关性（论文提纲范文）

（3）人三碘甲腺原氨酸抗体的制备和检测方法的建立及其方法学评价（论文提纲范文）

（4）血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C水平与甲状腺功能相关性研究（论文提纲范文）

（5）固相板酶免法测定人血清游离三碘甲状腺原氨酸（论文提纲范文）

四、固相板酶免法测定人血清游离三碘甲状腺原氨酸（论文参考文献）

• [1]化学发光免疫分析技术在医学中的应用[J]. 李小花,王海雁,刘荔贞,费鹏,王俊烽,杨嘉晖. 化学传感器, 2019(03)
• [2]COPD患者血清甲状腺激素水平变化及其与肺功能、中医辨证分型的相关性[D]. 章洁淳. 广州中医药大学, 2017(01)
• [3]人三碘甲腺原氨酸抗体的制备和检测方法的建立及其方法学评价[D]. 孔海霞. 重庆医科大学, 2012(01)
• [4]血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C水平与甲状腺功能相关性研究[D]. 冯秋霞. 青岛大学, 2008(07)
• [5]固相板酶免法测定人血清游离三碘甲状腺原氨酸[J]. 乔玲,李雪晶,张墨玲,赵学勤,张镜宇. 天津医科大学学报, 2003(04)
• [6]固相酶免疫分析用于血清FT3检测探讨[J]. 乔玲,张墨玲,赵学勤,张镜宇. 中国地方病学杂志, 2003(05)

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